客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱：6-羧基羅丹明6G（單一化合物）

規(guī)格：5 mg

貨號(hào)：BJP1227

分類：熒光核酸試劑

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法　

可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

?

檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

人H5型禽流感病毒（H5N1）抗體（IgG）分析檢測(cè)試劑盒PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb100 ul

犬CD4分子（CD4）分析檢測(cè)試劑盒LCMT1 (4A4) Mouse mAb100 ul

牛銅藍(lán)蛋白（CP）分析檢測(cè)試劑盒HMGN1 Antibody100 ul

綿羊骨鈣素/骨谷氨酸蛋白（OT/BGP）分析檢測(cè)試劑盒DBC1 Antibody100 ul

綿羊補(bǔ)體片段3a（C3a）分析檢測(cè)試劑盒RING1B (D22F2) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素（ADH/VP/AVP）分析檢測(cè)試劑盒RING1B (D22F2) XP® Rabbit mAb100 ul

大鼠黃體生成素（LH）分析檢測(cè)試劑盒HECTH9 (AX8D1) Mouse mAb100 ul

大鼠TAR DNA結(jié)合蛋白43（TARDBP）分析檢測(cè)試劑盒SMC3 (D47B5) Rabbit mAb100µg

猴超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）分析檢測(cè)試劑盒CD8α (2.43) Rat mAb (PE Conjugate)400 ul

猴補(bǔ)體片斷3b（C3b）分析檢測(cè)試劑盒Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (Magnetic Bead Conjugate)100 ul

駱駝脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PL-A2）分析檢測(cè)試劑盒Acetyl-Histone H4 (Lys16) (E2B8W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

駱駝天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）分析檢測(cè)試劑盒IGBP1 (5F6) Mouse mAb100 ul

植物環(huán)磷酸腺苷（cAMP）分析檢測(cè)試劑盒ApoA4 (1D6B6) Mouse mAb1 Kit

魚組（HIS）分析檢測(cè)試劑盒PathScan® Phospho-YAP (Ser397) Sandwich  Kit100 ul

魚卵泡刺激素（FSH）分析檢測(cè)試劑盒NMDA Receptor 1 (GluN1) (D65B7) Rabbit mAb100 ul

羊溶菌酶（LZM）分析檢測(cè)試劑盒p70 S6 Kinase (49D7) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul

蜥蜴雄烯二酮（ASD）分析檢測(cè)試劑盒ApoM (8F12) Mouse mAb100 ul
6-羧基羅丹明6G（單一化合物）Penicillium│spinulosum Thom分離基物: 馬尾松葉表斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 28存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.分離基物: 子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25-27存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Phenylobacterium│sp.分離基物: 水樣/上層海水凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 海洋可培養(yǎng)細(xì)菌多樣性研究培養(yǎng)基: 511生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Helicobacter│pylori分離基物: 胃標(biāo)本凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0021生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

Kribbella│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 雙功能酶抑制劑培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

Bacillus│mycoides凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 殺鱗翅目昆蟲抗噬菌體培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Pseudomonas│aeruginosa凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Marinobacter│psychrophilus分離基物: 沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/耐冷菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 15℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

米曲霉種屬: Aspergillus│oryzae分離基物: 原醬油凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 醬油糖化菌。培養(yǎng)基: 0091生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。