免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
CD40L  CD40L鹽酸妥洛特羅4-溴鄰二酚Human AC3 (Actinin Alpha 3) 檢測(cè)試劑盒

Iegrin alpha 2b/CD41  血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa鹽酸環(huán)侖特羅4-溴鄰二酚Human ACTα2 (Actin Alpha 2, Smooth Muscle) 檢測(cè)試劑盒

CD43/SPN  CD43溴甲東莨菪堿2,2-二甲基琥珀酸酐Human ACTα1 (Actin Alpha 1, Skeletal Muscle) 檢測(cè)試劑盒

CD44/PGP1  CD44無水磷酸氫二鈉2,2-二甲基琥珀酸酐Human ADA (Adenosine Deaminase) 檢測(cè)試劑盒

CD44v4  CD44V4鹽酸嗎啉胍對(duì)硝基肉桂Human ADAM10 (A Disiegrin And Metalloprotease 10) 檢測(cè)試劑盒

CD44v5  CD44V5水楊酰胺對(duì)硝基肉桂Human ADAM8 (A Disiegrin And Metalloprotease 8) 檢測(cè)試劑盒

CD44v6  CD44V6非普拉宗對(duì)硝基肉桂Human ADAM9 (A Disiegrin And Metalloprotease 9) 檢測(cè)試劑盒

CD44v7  CD44V7茴三硫蘇丹藍(lán)IIHuman ADAMTS4 (ADAM with Thrombospondin Type 1 Motif 4) 檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞分裂周期2樣蛋白激酶64-正基環(huán)己酮Porcine SSRP1 (Structure Specific Recognition Protein 1) 檢測(cè)試劑盒

補(bǔ)體C3IP14-正基環(huán)己酮Porcine PAR3 (Protease Activated Receptor 3) 檢測(cè)試劑盒

磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶22-羥基-4-甲氧基-5-磺酸二甲酮Porcine Bax (Bcl-2 Associated X Protein) 檢測(cè)試劑盒

周期素依賴性激酶11雙(三-o-甲基膦)二氯化鈀(II)Porcine NUP155 (Nucleoporin 155kDa) 檢測(cè)試劑盒

周期素依賴性激酶101-溴-4-三氟甲氧基Porcine TLA (Thymus Leukemia Aigen) 檢測(cè)試劑盒

8號(hào)染色體開放閱讀框861-溴-4-三氟甲氧基Porcine MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) 檢測(cè)試劑盒

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B(S)-(+)-酮基蒎酸Porcine COL6α3 (Collagen Type VI Alpha 3) 檢測(cè)試劑盒

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B(S)-(+)-酮基蒎酸Porcine 5- (5-Nucleotidase) 檢測(cè)試劑盒
Centaurin α1抗體褐孢大禿馬勃Rat PTX3 (Peraxin 3)  Kit

微小桿Rat 20S-PSM (20S-Proteasome)  Kit

香菇Rat CK-18/KRT18 (Cytokeratin 18)  Kit

鏈霉Rat TCF20 (Transcription factor 20)  Kit

矮小傘枝霉Rat ERRα (Estrogen Rated Receptor Alpha)  Kit

大腸埃希Rat α2-AP (α2-Aiplasmin)  Kit

單梗頭孢霉屬Rat TFR2 (Transferrin Receptor Protein 2)  Kit

毛尖蘑Rat TFR (Transferrin Receptor)  Kit