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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
α-甲基酰基輔酶A消旋酶抗體 | AMACR | BJ-K6948 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導(dǎo)細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘撸瑢㈦s交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
Beta-casein( Beta-casein)/FITC 熒光素標記 β-酪蛋白()IgG腺苷酸環(huán)化酶15-氨基-2-溴甲酸Mouse STAT1 (Signal Transducer And Activator Of Transcription 1) 檢測試劑盒
BFGF/FITC 熒光素標記堿性成纖維細胞生長因子IgG核糖核酸酶L抑制蛋白5-氨基-2-溴甲酸Mouse STAT2 (Signal Transducer And Activator Of Transcription 2) 檢測試劑盒
BGP/FITC 熒光素標記骨保護蛋白/骨鈣素IgGRho GTP酶激活蛋白243-氨基-4-甲氧基甲酸Mouse STAT3 (Signal Transducer And Activator Of Transcription 3) 檢測試劑盒
Bid/FITC 熒光素標記BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白IgGGTP酶激活蛋白ASAP33-氨基-4-甲氧基甲酸Mouse STAT4 (Signal Transducer And Activator Of Transcription 4) 檢測試劑盒
AQP-2/HRP (aquaporin Protein-2) 辣根過氧化物酶標記水通道蛋白-2IgG激活素受體1C3,5,7,8-四氫-2-甲基-4H-硫代吡喃并[4,3-D]嘧啶-4-酮Mouse STAT5A (Signal Transducer And Activator Of Transcription 5A) 檢測試劑盒
BIN1/FITC 熒光素標記橋連整合因子蛋白IgG整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶13型3,5,7,8-四氫-2-甲基-4H-硫代吡喃并[4,3-D]嘧啶-4-酮Mouse STAT6B (Signal Transducer And Activator Of Transcription 5B) 檢測試劑盒
Bim/FITC 熒光素標記細胞死亡調(diào)解子IgG去整合素樣金屬蛋白酶11反式雙(三乙基膦)二氯化鈀(II)Mouse STAT6 (Signal Transducer And Activator Of Transcription 6) 檢測試劑盒
phospho-Bim(Ser55) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞死亡調(diào)解子IgG去整合素樣金屬蛋白酶12反式雙(三乙基膦)二氯化鈀(II)Mouse Smad1 (Mothers Against Decapeaplegic Homolog 1) 檢測試劑盒
A Raf/ARAF/FITC 熒光素標記A-RafIgGBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白7Boc-L-天冬氨酸1-芐酯Rat CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) 檢測試劑盒
Phospho-A Raf (Ser299) /FITC 熒光素標記磷酸化A-RafIgG腦特異性血管生成抑制蛋白1Bradykinin poteiator CRat CHD5 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 5) 檢測試劑盒
Phospho-A Raf (Tyr301/302) /FITC 熒光素標記磷酸化A-RafIgGBcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子二乙基磷Rat CHGA (Chromogranin A) 檢測試劑盒
JAM1/CD321/FITC 熒光素標記連接粘附分子1IgG腦環(huán)核苷酸門控通道蛋白1二乙基磷Rat CF (Ciliary Neurotrophic Factor) 檢測試劑盒
cRaf/Raf1(c-raf 1) /FITC 熒光素標記抗cRaf/Raf1IgG癌易感基因復(fù)合蛋白46-庚炔酸Rat CROP (Cisplatin Resistance Associated Overexpressed Protein) 檢測試劑盒
CREB-1/FITC 熒光素標記環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白IgG紡錘體檢查點蛋白6-庚炔酸Rat CS (Citrate Syhase) 檢測試劑盒
P-CREB-1/FITC 熒光素標記磷酸化環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白IgG有絲分裂檢驗點蛋白BubR12-溴-9-芴酮Rat c-jun 檢測試劑盒
C-REL/FITC 熒光素標記淋巴細胞衍生C-型凝集素IgG癌相關(guān)蛋白32-溴-9-芴酮Rat JNK (C-Jun N-Terminal Kinases) 檢測試劑盒
α-甲基?;o酶A消旋酶抗體Schizophyllum│commune Fr.分離基物: 桃樹提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25定期移植法
Aspergillus│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no活性物質(zhì);抗炎培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 28C-80℃冰箱凍結(jié)
Cephalosporium│roseogriseum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pestalotiopsis│sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Corynebacterium│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no煙臺味精廠生產(chǎn),生產(chǎn)谷氨酸。培養(yǎng)基: CM0367生長條件: 37℃真空冷凍干燥法
Planococcus│citreus分離基物: 水樣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0223生長條件: 30℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Fusarium│solani提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Aspergillus│niger提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no甘蔗糖蜜淺盤發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸。培養(yǎng)基: CM0085生長條件: 28-30℃定期移植法;其他
Lactobacillus│jensenii分離基物: 健康孕婦分泌物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
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