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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
3號染色體開放閱讀框25抗體 | C3orf25 | BJ-K8290 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導(dǎo)細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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多克隆抗體定制:
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
MASH1 神經(jīng)母細胞特異性轉(zhuǎn)移因子甲氧芐啶O-基-N-叔丁基羰基-L-酪氨酸NF-H(Neurofilame triplet H) 高分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)
ASIC1/BNaC2 酸敏感離子通道1己酸羥孕酮甘氨酰胺鹽酸鹽NIS(Na+/I-symporter;NIS) 鈉轉(zhuǎn)運體蛋白(多肽抗原)
ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1己烯雌酚甘氨酰胺鹽酸鹽NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)
ASPP2/p53BP2 P53凋亡刺激蛋白2枸櫞酸氯米芬甘氨酰胺鹽酸鹽NR2A (Glutamate receptor2A) 谷氨酸受體(N端抗原)
AGT 血管緊張素原甲磺酸雙氫麥角堿2-溴-1H-咪唑NRP-1(neuropilin-1) 神經(jīng)纖毛蛋白-1(抗原)
Angiotensin I 血管緊張素I克霉唑2-溴-1H-咪唑NRP-2(neuropilin-2) 神經(jīng)纖毛蛋白-2(抗原)
AT1R/AGTR1 血管緊張素Ⅱ-1型受體鄰甲磺酰胺2-溴-1H-咪唑NSBP1(Nucleosome-binding protein 1) 核小體結(jié)合蛋白1(抗原)
AT1R (Whole serum) 血管緊張素Ⅱ-1型受體6-巰基嘌呤2-氨基-4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三P,Neurual thread protein 神經(jīng)絲蛋白(抗原)
凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白17異煙酰氯鹽酸鹽Porcine NAP (Neutrophil Alkaline Phosphatase) 檢測試劑盒
凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白4異煙酰氯鹽酸鹽Porcine ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) 檢測試劑盒
4號染色體開放閱讀框34Phe-AlaPorcine LPL (Lipoprotein Lipase) 檢測試劑盒
酪蛋白激酶1γ3/CKI γ3Phe-ValPorcine TIMP-1 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) 檢測試劑盒
凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白94,7-二羥基-1,10-菲羅啉Porcine NUP50 (Nucleoporin 50kDa) 檢測試劑盒
膽固氧化酶4,7-二羥基-1,10-菲羅啉Porcine Grb7 (Growth Factor Receptor Bound Protein 7) 檢測試劑盒
半胱胺酸蛋白酶蛋白14-d3Porcine PF3 (Plaet Factor 3) 檢測試劑盒
半胱胺酸蛋白酶蛋白5-d3Porcine COLEC11 (Collectin Sub-Family Member 11) 檢測試劑盒
3號染色體開放閱讀框25抗體貝萊斯芽胞桿Rat MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) Kit
木賊鐮孢Rat MMP-8 (Matrix Metalloproteinase 8) Kit
淺灰白鏈霉Rat MMP-9 (Matrix Metalloproteinase 9) Kit
假單胞屬Rat ANG (Angiogenin) Kit
釀酒酵母Rat ANG1 (Angiopoietin 1) Kit
玉米大斑病Rat SLC (Secondary Lymphoid Tissue Chemokine) Kit
薄花邊傘Rat MT1 (Metallothionein 1) Kit
東方伊薩酵母Rat MHB (Methemoglobin) Kit
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