免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過(guò)0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過(guò)程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
Rat IgA/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗大鼠IgA腺相關(guān)病5 VP14-甲基-2-甲Mouse Lp-a (Lipoprotein a) 檢測(cè)試劑盒

ABI1/SSH3BP1/FITC  熒光素標(biāo)記ABI1/SSH3BP1蛋白IgG脂肪脫氫酶4-甲基-2-甲Mouse Lp-PL-A2 (Lipoprotein-associated Phospholipase A2) 檢測(cè)試劑盒

ACD/PTOP/FITC  熒光素標(biāo)記腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白IgG抗利尿激素1A4-甲基-2-甲Mouse PAL (L-Phenylalanine ammonla-lyase) 檢測(cè)試劑盒

ACE1/FITC  熒光素標(biāo)記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶IgG抗利尿激素受體1B2-氨基-4-甲Mouse LHRH (Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) 檢測(cè)試劑盒

ACE2/FITC  熒光素標(biāo)記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2IgG二磷酸腺苷核糖基化因子鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子22-氨基-4-甲Mouse LFA-3 (lymphocyte function associated aigen 3) 檢測(cè)試劑盒

ACEI/FITC  熒光素標(biāo)記血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑IgGα增強(qiáng)子結(jié)合蛋白14-芐氧基吡啶-N-氧化物Mouse Lp/XCL1 (Lymphotactin) 檢測(cè)試劑盒

Acetyl CoA Carboxylase/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴、牛乙酰輔酶A羧化酶IgG脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)104-芐氧基吡啶-N-氧化物Mouse LZM (Lysozyme) 檢測(cè)試劑盒

Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴、牛磷酸化乙酰輔酶A羧化酶IgG蛋白激酶A錨定蛋白7肉桂基氯Mouse BSP (Bone Sialoprotein) 檢測(cè)試劑盒

CD31/FITC  熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1IgG腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白4-溴-2-甲基噻吩Mouse LDL (Low Density Lipoprotein) 檢測(cè)試劑盒

CD31(PECAM-1)/PE  熒光素PE標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1IgG膽鹽激活脂肪酶4-溴-2-甲基噻吩Mouse FASN (Fatty Acid Syhase) 檢測(cè)試劑盒

CD31(PECAM-1)/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1IgG3-羥丁酸脫氫酶7-硝基吲唑Mouse HDL (High Density Lipoprotein) 檢測(cè)試劑盒

CD31/FITC  熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1IgG長(zhǎng)鏈脂肪酸?；o酶A水解酶7-硝基吲唑Mouse c/2 (Troponin T Type 2, Cardiac) 檢測(cè)試劑盒

CD33/Siglec-3/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD33IgG磷酸化癌易感基因1代磷酸二乙酯Mouse PYY (Peptide YY) 檢測(cè)試劑盒

CD33/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD33IgG磷酸化β分泌酶代磷酸二乙酯Mouse SOD1 (Superoxide Dismutase 1, Soluble) 檢測(cè)試劑盒

CD33L/OBBP1/FITC  熒光素標(biāo)記兔CD33LIgG磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子2-氯煙酸Mouse IgG2b (Immunoglobulin G2b) 檢測(cè)試劑盒

CD34/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、兔、牛、豬、犬CD34IgG磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子2-氯煙酸Mouse IgG2c (Immunoglobulin G2c) 檢測(cè)試劑盒
血管緊張素Ⅱ受體2抗體Eerobacter│cloacae提供形式: 凍干物；凍結(jié)物模式株: no培養(yǎng)基: 820生長(zhǎng)條件: 22℃-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Marella│mediterranea分離基物: 水樣/深海底層水樣提供形式: 凍干物模式株: no潛在的有機(jī)污染物降解/分離自石油富集群培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Micromonospora│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no抗真；抗白色念珠培養(yǎng)基: CM0038生長(zhǎng)條件: 28C-80℃冰箱凍結(jié)

Alcanivorax│jadensis分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式株: no有機(jī)污染物降解/石油烴類降解培養(yǎng)基: 745生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Cladosporium│herbarum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

云南游動(dòng)放線種屬: Actinoplanes│yunnanensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: yes模式株培養(yǎng)基: 0011生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 病料提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式株: no科研及血清定型培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37真空冷凍干燥法;

Streptomyces│sp.分離基物: 表面土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no分類學(xué)及微生物藥物學(xué)的研究培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃真空冷凍干燥法；其他

Pelagicola│litoralis分離基物: 沉積物/深灰色沉積物提供形式: 凍干物模式株: no極地細(xì)培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 15℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法