免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
Phospho-LKB1(Thr189)  磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶他唑巴坦2-氨基-6-溴甲酸Human PLA1 (Phospholipase A1) 檢測試劑盒

LFABP/FABP-1  肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白頭孢他美酯2-氨基-6-溴甲酸Human GLO1 (Glyoxalase I )檢測試劑盒

LFABP/FABP-2  肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白米諾環(huán)素2-氨基-4-溴甲酸Human PLSCR1 (Phospholipid Scramblase 1) 檢測試劑盒

laminin  層粘連蛋白慶大霉素C1a2-氨基-4-溴甲酸Human PLSCR2 (Phospholipid Scramblase 2) 檢測試劑盒

Laminin Beta 1  層粘連蛋白β1地紅霉素2-氨基-4-溴甲酸Human PI3K2α (Phosphoinositide-3-Kinase Class-2-Alpha Polypeptide) 檢測試劑盒

lamin A  核纖層蛋白A頭孢泊肟酯2-氨基-3-溴甲酸Human GPC1 (Glypican 1) 檢測試劑盒

Phospho-Lamin A/C (Ser22)  磷酸化核纖層蛋白A/C加替沙星2-氨基-3-溴甲酸Human GPC2 (Glypican 2) 檢測試劑盒

Lamin B  核纖層蛋白B美洛西林(-)-二氫香芹酯Human GPC3 (Glypican 3) 檢測試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白Monkey MAdCAM1 (Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule 1) 檢測試劑盒

內(nèi)皮粘蛋白EMCNMonkey SRP9 (Signal Recognition Particle 9kDa) 檢測試劑盒

環(huán)磷酸腺苷調(diào)節(jié)鳥嘌呤核苷酸交換因子1Monkey UBE2A (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A) 檢測試劑盒

磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F1Monkey ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) 檢測試劑盒

上皮細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1Monkey CDK1 (Cyclin Depende Kinase 1) 檢測試劑盒

內(nèi)皮素2Monkey CC16 (Clara Cell 16KD Protein) 檢測試劑盒

內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶B3Monkey ANG I (Angiotensin I) 檢測試劑盒

軟骨外胚層發(fā)育不良相關(guān)蛋白Monkey ECM1 (Extracellular Matrix Protein 1) 檢測試劑盒
唾液酸糖蛋白受體1抗體不動(dòng)桿Porcine EPHA10 (Ephrin Type A Receptor 10)  Kit

圓紅酵母Porcine F8 (Coagulation Factor Ⅷ)  Kit

平菇—桃紅平菇Porcine MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3)  Kit

桔青霉Porcine PKCε (Protein Kinase C Epsilon )  Kit

枯草芽孢桿Porcine CD28 (Cluster of Differeiation 28)  Kit

大腸埃希氏O抗原微量凝集定型血清診斷液Porcine SDH (Sorbitol Dehydrogenase)  Kit

大腸桿Porcine PRCP (Prolylcarboxypeptidase)  Kit

人參土成對桿Porcine C8b (Compleme Compone 8b)  Kit