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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 蛋白激酶A錨定蛋白7抗體 |
英文名稱 | AKAP7 |
貨號 | BJ-K6867 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Piezo1抗體(0.2ml)100 ul Anti-Piezo1ELISA試劑盒英文名稱:Rabbit Renin ELISA Kit *
兔雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒 英文名稱:Rabbit Dihydro testosterone,DHT ELISA Kit進口/分裝
兔糖化血紅蛋白A1cA1c)ELISA試劑盒英文名稱:Rabbit Glycated hemoglobin A1cA1c ELISA Kit 進口/分裝
兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 英文名稱:Rabbit plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit*
亮抑酶肽Leupeptin -20℃保存2mg
亮抑蛋白酶肽溶液,10 mg/mLLeupeptin Solution4℃保存一周,-20℃保存6個月1mL
亮綠 SF( 淡黃 )Light Green SF Yellowish室溫干燥保存5g
亮綠Brilliant Green室溫保存5g
兩棲和爬行類動物種屬鑒定PCR Mix(線粒體CO1基因)Animal DNA Barcoding PCR Mix-20℃保存100次
兩管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)Two-Tube RT PCR Kit-20℃保存50次
兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)50次
鏈球菌B族PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存50T
鏈親和素Streptavidin-20℃保存1mg
鏈脲佐菌素溶液,10mg/mLStreptozotocin Solution-20℃保存10mL 異亮氨酸24629-25-2100mg,供鑒別與含量測定用
異環(huán)磷酰胺雜質(zhì)Ⅰ Ifosfamide ImpurityⅠ約50 mg/支,供HPLC法檢查用
異環(huán)磷酰胺雜質(zhì)Ⅰ Ifosfamide ImpurityⅠ約50 mg/支,供HPLC法檢查用
異甘草酸鎂 Magnesium Isoglycyrrhizinate100mg/支,供HPLC法測定用
異甘草酸鎂 Magnesium Isoglycyrrhizinate100mg/支,供HPLC法測定用
異丙硝唑-D3Ipronidazole-D350mg
異丙硝唑Ipronidazole50mg
乙酰水楊酸/阿司匹林 Acetylsalicylic acid50-78-20.25g
乙酰螺旋霉素 Acetylspiramycin24916-51-6200mg,供效價及組分測定用
乙酰磷酸二鋰鹽300mg
人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Human Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit
人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Human type Ⅱ collagen helical peptide,HELIX-ⅡELISA Kit
人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Human Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA Kit
人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit
人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Human Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit
人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4,ADAMTS4 ELISA Kit
人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒英文名稱:Rat transferrin receptor,TFR ELISA Kit*
大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat Total bile acide,TBA ELISA Kit*
大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Histamine,HIS ELISA Kit*
大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒英文名稱:Rat histon-H2b ELISA Kit進口/分裝
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Cathepsin ?
PH與SEC7域含蛋白4多克隆抗體500 ul PSD4 Polyclonal Antibody
PH結(jié)構(gòu)域且富含亮氨酸重復(fù)基序的絲/蘇氨酸蛋白磷酸酶1多克隆抗體100 ul PHLP1 Polyclonal Antibody
PHOX2B抗體1 Kit PHOX2B Antibody (Neuroblastoma Phox, NBPhox)
PHOX2A抗體(C末端)100 ul PHOX2A Antibody (CT) (Paired-like homeobox 2A, Paired mesoderm homeobox protein 2A, PMX2A, NCAM2, FEOM2, CFEOM2, ARIX)
Phospho-VASP抗體20 ul Phospho-VASP Antibody,Vasodilator-stimulated phosphoprotein
Phospho-TyrosineHydroxylase抗體100 ul Phospho-Tyrosine Hydroxylase Antibody,Tyrosin Hydroxylase
蛋白激酶A錨定蛋白7抗體栗疫菌Bacillus megaterium de Bary黃褐假單胞菌
紅色紅曲Pleomorphomonas oryzae Xie and Yokota呼吸系統(tǒng)貪銅菌
平菇(江都156)frozen產(chǎn)黃假單胞菌
Pseudomonas entomophila L48frozen賽維瓦爾假單胞菌
產(chǎn)紫青霉Phlinus livescens (Spegazzini) Rajchenber ..油菜假單胞菌
植物乳桿菌Yarrowia lipolytica (Wickerham et al.) van ..化烴微桿菌
椿象紅球菌Lactobacillus sp.洋蔥伯克霍爾德菌
沙場鏈霉菌Escherichia coli (Migula) Caslani and Ch ..彎曲芽胞桿菌
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