當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> 腺相關(guān)病毒5 VP1抗體
免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 腺相關(guān)病毒5 VP1抗體 |
英文名稱 | AAV5 capsid protein VP1 |
貨號 | BJ-K6860 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
ADRB2/FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺素能受體β2IgG小腸鈉通道蛋白5異硫酸熒光素Mouse ATPase (ATPase, Na+/K+ Transporting) 檢測試劑盒
ADRB2(phospho Ser346)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化腎上腺素能受體β2IgGAPXL蛋白異硫酸熒光素Mouse NN-T4 (Neonatal Thyroxine) 檢測試劑盒
ADRB2/RBITC 羅丹明標(biāo)記腎上腺素能受體β2IgG酸敏感離子通道蛋白3異喹啉-3-羧酸甲酯Mouse NGF (Nerve growth factor) 檢測試劑盒
ADRB3/ Beta3-AR /RBITC 羅丹明標(biāo)記腎上腺素能受體β3IgG天門冬氨酸β羥化酶異喹啉-3-羧酸甲酯Mouse NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) 檢測試劑盒
ADRB3/ Beta3-AR /FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺素能受體β3IgG精氨酸加壓素受體2羥基(甲磺酰氧代)Mouse NF (Neurofilame Protein) 檢測試劑盒
CD8/RBITC 羅丹明標(biāo)記CD8IgG細(xì)胞骨架肌動蛋白樣蛋白3羥基(甲磺酰氧代)Mouse NGB (Neuroglobin) 檢測試劑盒
AD7C/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白IgG膜粘連蛋白83,5-雙(三氟甲基)甲Mouse Slit2 (Slit Homolog 2) 檢測試劑盒
AD7C-P/P/AF /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白(人)Ig通道蛋白83,5-雙(三氟甲基)甲Mouse NPY (Neuropeptide Y) 檢測試劑盒
CD69/CLEC2C/AIM/FITC 熒光素標(biāo)記活化誘導(dǎo)分子CD69IgGBcl2相關(guān)抗凋亡基因63-*硅烷基炔Mouse EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) 檢測試劑盒
CD73/FITC 熒光素標(biāo)記胞漿-5´-核苷酸酶-ⅡIgG半乳糖轉(zhuǎn)移酶7亞基β1,43-*硅烷基炔Mouse EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor)檢測試劑盒
CD79A/IGBP-1 /FITC 熒光素標(biāo)記免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1IgGBEN結(jié)構(gòu)域蛋白53-*硅烷基炔Mouse IL-1R2 (Ierleukin 1 Receptor Type II) 檢測試劑盒
B7-1/CD80 /FITC 熒光素標(biāo)記抗刺激分子B7-1蛋白IgG巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5TeniposideMouse FSF14 (Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 14)檢測試劑盒
CD80/B7-1/FITC 熒光素標(biāo)記刺激分子B7-1蛋白IgG癌相關(guān)蛋白1Ethynodiol diacetateMouse MCSF (Macrophage Colony Stimulating Factor 1) 檢測試劑盒
CD82/KAI1/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1IgG腦蛋白CG6Ethynodiol diacetateMouse IL-22 (Ierleukin 22) 檢測試劑盒
CD83/Cell surface protein HB15/FITC 熒光素標(biāo)記CD83IgG晶狀體蛋白2Ethynodiol diacetateMouse ApoA1 (Apolipoprotein A1) 檢測試劑盒
CD84/SLAMF5/FITC 熒光素標(biāo)記CD84IgG7號染色體開放閱讀框27正辛基 α-D-葡萄糖苷Mouse PL (Pancreatic Lipase) 檢測試劑盒
腺相關(guān)病毒5 VP1抗體多粘類芽孢桿種屬: Paenibacillus│polymyxa提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│cereus分離基物: 膽南星提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no飼料添加劑培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Candida│parapsilosis分離基物: 沉積樣/老鼠勒根泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no近海酵母培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法
Auricularia│auricula分離基物: 朽木提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no用于生產(chǎn)食用培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃真空冷凍干燥法
Sporobolomyces│roseus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no用于真擲孢現(xiàn)象教學(xué)培養(yǎng)基: 13生長條件: 28℃真空冷凍干燥法
凝結(jié)芽孢桿種屬: Bacillus│coagulans分離基物: 乳制品提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: yes產(chǎn)糖苷水解酶抑制物、產(chǎn)L(+)乳酸培養(yǎng)基: 348生長條件: 37℃真空冷凍干燥法
模式株: 未知
Tricholoma│inocybeoides A. Pearson分離基物: 蓋或柄提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 26定期移植法
Penicillium│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no抗真培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C液氮超低溫凍結(jié)
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