客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱(chēng)：磺基羅丹明B磺酰氯

規(guī)格：100 mg

貨號(hào)：BJP1207

分類(lèi)：熒光核酸試劑

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

染料法

探針?lè)ā?/span>

可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) 

·溶解曲線(xiàn) ·擴(kuò)增曲線(xiàn)

·完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針?lè)ǎ?/span>

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。

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檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

大鼠血清淀粉樣蛋白A SAA Kit圖片HDAC4 (4A3) Mouse mAb100 ul

大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋1 Kit品牌SMC2 (D91E3) Rabbit mAb100 ul

人Apelin-12 Kit說(shuō)明書(shū)IL-1α (D4F3S) Rabbit mAb (Mouse Specific) (PE Conjugate)100 ul

人P物質(zhì) Kit圖片Phospho-Cyclin D3 (Thr283) (E1V6W) Rabbit mAb100 ul

人β-防御素2 Kit圖片Stat6 (D3H4) Rabbit mAb100 ul

人半乳糖凝集素-3 Kit多少錢(qián)KHSRP Antibody100 ul

人促甲狀腺素受體抗體 Kit圖片Phospho-eIF4B (Ser406) Antibody100 ul

人促胰液素 Kit多少錢(qián)Ribosomal Protein L26 (D8F6) Rabbit mAb100 ul

人抵抗素 Kit品牌EGF Receptor (E746-A750del Specific) (D6B6) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)1 Kit

人高遷移率族蛋白1 Kit品牌Rpb1 CTD Antibody Sampler Kit100 ul

人骨形成蛋白2 Kit多少錢(qián)C17orf59 (D2B5X) Rabbit mAb100 ul

人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子－1β Kit圖片PI3 Kinase p110γ (D55D5) Rabbit mAb20 ul

人抗血小板抗體是一種IgG Kit多少錢(qián)PI3 Kinase p110γ (D55D5) Rabbit mAb100 ul

人神經(jīng)降壓素 Kit圖片p300 (D2X6N) Rabbit mAb100 ul

人抑制素A Kit品牌ZO-1 Antibody1 Kit

小鼠β淀粉樣蛋白1-40 Kit說(shuō)明書(shū)PhosphoPlus® RIP3 (Ser227) Antibody Duet100 ul

小鼠骨特異性堿性磷酸酶B  Kit說(shuō)明書(shū)Lamin A/C (4C11) Mouse mAb (Biotinylated)100 ul
磺基羅丹明B磺酰氯Streptomyces│glauciniger分離基物: 土壤/近海紅樹(shù)林土壤斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Bacillus│sp.分離基物: 烏稍蠔凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于堿性蛋白酶研究。培養(yǎng)基: CM0033生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Paenisporosarcina│macmurdoensis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 848生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Sporobolomyces│jilinensis分離基物: Tilia amurensis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 17℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Escherichia│coli凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Bacillus│subtilis分離基物: 臭豆腐凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于產(chǎn)纖溶酶的研究培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Haemophilus│parasuis分離基物: 腹腔積液凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研教學(xué)培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

熒光假單胞菌種屬: Pseudomonas│fluorescens分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0033生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

傷寒沙門(mén)氏菌種屬: Salmonella│typhi凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi F3　　　9,12,Vi　d　-培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱(chēng)、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線(xiàn)；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針?lè)ǎ?，可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線(xiàn)、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。