客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱：5-羧基熒光素（單一化合物）

規(guī)格：100 mg/1 g/5 g

貨號(hào)：BJP1212

分類：熒光核酸試劑

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法　

可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

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檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

雙白瑞香素2034-69-7實(shí)驗(yàn)方法Androgen Receptor Antibody (Carboxy-terminal Antigen)200 ul

松蘿酸125-46-2實(shí)驗(yàn)步驟Phospho-Tyrosine Mouse mAb (P-Tyr-100) (HRP Conjugate)100 ul

西紅花苷II55750-84-0*TIM-3 (D5D5R™) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

腺苷58-61-7實(shí)驗(yàn)方法RagC (D31G9) XP® Rabbit mAb20 ul

91-64-5*RagC (D31G9) XP® Rabbit mAb100 ul

原矢車菊B1 20315-25-7*Synaptophysin (D40C4) Rabbit mAb100 ul

異水飛薊賓72581-71-6*BSP II Antibody100 ul

烏金甙價(jià)格TTK (D15B7) Rabbit mAb100 ul

高良姜素548-83-4實(shí)驗(yàn)步驟Anti-mouse IgG (H+L) (DyLight™ 680 Conjugate)500 ul

BOC-L-高丙氨酸價(jià)格Anti-mouse IgG (H+L) (DyLight™ 680 Conjugate)100 ul

FMOC-D-丙氨酸使用說明書Livin (D61D1) XP® Rabbit mAb20 ul

硅膠板H價(jià)格Livin (D61D1) XP® Rabbit mAb100 ul

桿菌肽〖鋅〗保存Phospho-PLK1 (Thr210) Antibody20 ul

莫西沙星保存Phospho-PLK1 (Thr210) Antibody100 ul

2-氨基-4-噻唑價(jià)格YTHDC1 (D10) Antibody100 ul

溶壁酶保存Phospho-Src (Ser17) Antibody100 ul

乙醇脫氫酶價(jià)格Diap2 Antibody100 ul
5-羧基熒光素（單一化合物）Pseudomonas│fluorescens分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類、研究，具有處理富營養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法

Pseudochrobactrum│asaccharolyticum分離基物: 沉積物/表層沉積物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)醚富集菌群培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Flavobacterium│degerlachei分離基物: 沉積物/深灰色沉積物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶菌株培養(yǎng)基: 821生長條件: 15℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 死亡雞凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus分離基物: 病雞凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 其他;

Escherichia coli DH5α( pUC19)西林瓶，菌片安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: pUC19質(zhì)粒提取。培養(yǎng)基: LB培養(yǎng)基，含50μg/mL氨芐青霉素鈉。

酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃，15min滅菌。 滅菌結(jié)束，冷卻降溫后加入氨芐青霉素鈉，使培養(yǎng)基中氨芐青霉素鈉終含量為50μg/mL。生長條件: 37℃  ，好氧存儲(chǔ)條件: -20℃避光保存；運(yùn)輸條件：常溫運(yùn)輸。

嗜熱鏈球菌種屬: Streptococcus│thermophilus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 巴氏滅菌典型株。培養(yǎng)基: CM0503生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Bacillus│safensis分離基物: 生物樣/野生鯔魚腸道內(nèi)容物凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 共生微生物/野生鯔魚腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/脂酶（三丁酸甘油酯）、蛋白酶、纖維素酶培養(yǎng)基: 33生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Boletus│edulis Bull.:Fr.分離基物: 子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用菌培養(yǎng)基: 150生長條件: 28-30存儲(chǔ)條件: 定期移植法
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。