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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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長(zhǎng)柄鏈格孢(斜面)保存

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更新時(shí)間:2020-11-22 20:39:22瀏覽次數(shù):252次

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長(zhǎng)柄鏈格孢(斜面)保存低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。

基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。

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規(guī)格參數(shù):
資源名稱  長(zhǎng)柄鏈格孢(斜面)保存
種屬: Alternaria longipes (Ellis & Everh.) E.W. Mason

分離基物: 油松

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 研究;教學(xué)

培養(yǎng)基: 綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。

生長(zhǎng)條件: 25℃,好氧

生長(zhǎng)特性:
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
豚鼠氣單胞菌安全等級(jí)1提供形式凍干物,斜面培養(yǎng)物種屬Aeromonas caviae

阿薩斯絲孢酵母模式菌株安全等級(jí)1種屬Trichosporon asahii

黃色毛霉模式菌株安全等級(jí)1種屬M(fèi)ucor flavus

巴西青霉模式菌株安全等級(jí)1種屬Penicillium brasilianum

殺真菌素鏈霉菌模式菌株yes安全等級(jí)1種屬Streptomyces│fungicidicus

惡臭假單孢菌模式菌株安全等級(jí)1種屬Pseudomonas│putida

德式乳桿菌保加利亞亞種模式菌株yes安全等級(jí)1種屬Lactobacillus│delbrueckii subsp.bulgaricus

馬賽博斯氏菌安全等級(jí)1提供形式凍干物種屬Bosea│massiliensis

兔蛋白激酶A-C酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱:Rabbit PKA-C ELISA Kit

反應(yīng)性:Rabbit

樣品類型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

檢測(cè)范圍:250-16000 pg/ml

靈敏度:10 pg/ml

檢測(cè)目標(biāo):PKA-C

應(yīng)用:Sandwich ELISA
發(fā)酵冬蟲夏草菌粉英文名稱:Fermented Cordyceps powder保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g端粒酶抑制因子PinX1一抗

大皂角英文名稱:Gleditsia保存:20℃,避光規(guī)格:1g泌乳素受體一抗

土牛膝英文名稱:Achyranthes aspera保存:20℃,避光規(guī)格:5g絲/蘇蛋白酶4C一抗

葫蘆巴英文名稱:Fenugreek保存:20℃,避光規(guī)格:1g酯酶Cβ2一抗

浮萍英文名稱:Duckweed保存:20℃,避光規(guī)格:1g胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1一抗

海金沙英文名稱:The Sea Sands保存:20℃,避光規(guī)格:1g豬圓環(huán)Ⅱ型衣殼蛋白

急性子英文名稱:The acute保存:20℃,避光規(guī)格:4g氧還蛋白過氧化物酶Ⅱ/巰基抗氧化蛋白一抗

烏靈菌粉英文名稱:Wuling mycelia powder保存:20℃,避光規(guī)格:2g相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1一抗

麻(中麻)英文名稱:Ephedra (Ephedra intermedia)保存:20℃,避光規(guī)格:1g化脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)一抗

西河柳英文名稱:Chinese tamarisk保存:20℃,避光規(guī)格:2g化蛋白酶2A(PP2Aα)一抗

去二異香英文名稱:Go to the hydrogen two isoeugel保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)一抗

L脯英文名稱:The L Pro保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支脂酶2結(jié)構(gòu)域3一抗

L羥脯英文名稱:L hydroxyproline保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1一抗

二姜黃素英文名稱:Two hydrogen curcumin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支血小板白細(xì)胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M2一抗

姜黃素英文名稱:Curcumin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支Ⅱ型膠原α1 N端前體肽一抗

去氧姜黃素英文名稱:Demethoxycurcumin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支蛋白香葉基轉(zhuǎn)移酶1α一抗

雙去氧姜黃素英文名稱:Bisdemethoxycurcumin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支蛋白香葉基轉(zhuǎn)移酶1β(FTβ)一抗
長(zhǎng)柄鏈格孢(斜面)保存卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白56抗體Albatrelin C中文名:別名:分子式:C22H30O2

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白116抗體Pyrolin中文名:鹿蹄草素別名:2-Methylhydroquine; 2-Methyl-1,4-benzenediol分子式:C7H8O2

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白117抗體Anemarrhena B中文名:別名:分子式:C32H34O6

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白127抗體Androsin中文名:草夾竹桃苷別名:分子式:C15H20O8

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白138抗體Albatrelin G中文名:別名:分子式:C22H32O3

 

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