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單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
中心體蛋白97kDa抗體 | CEP97 | BJ-K8239 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘撸瑢㈦s交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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多克隆抗體定制:
當(dāng)機(jī)體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補(bǔ)體,結(jié)合并增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護(hù)胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強(qiáng)的激活補(bǔ)體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面,是 B 細(xì)胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Phospho-Ack1(Tyr284) 磷酸化Ack1蝙蝠葛堿2-甲氧基吡啶MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原
Phospho-Ack1(Tyr326) 磷酸化Ack1馬錢苷(馬錢素)2-甲氧基吡啶TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1) 肺癌腫瘤阻抑基因1抗原
ACTH (1-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)鉤藤堿2-甲氧基吡啶TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) 甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗原
ACTH (18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)異鉤藤堿二(4-溴基)胺Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原
ACTH (7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)吉馬酮二(4-溴基)胺TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原
Actin alpha 肌動蛋白α桔梗皂苷D3-氨基吡-2-甲酸甲酯T Beta10 peptide 胸腺素β10抗原
Actinin alpha 4 α-輔肌動蛋白4野百合堿3-氨基吡-2-甲酸甲酯UCN(Urocortin)mouse ret 新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)
F-Actin 纖維狀肌動蛋白葒草苷3-氨基吡-2-甲酸甲酯USF-1(upstream stimulatory factor 1) 上游刺激因子1抗原
L選擇素3,9-雙十八烷氧基-2,4,8,10-四氧-3,9-二磷螺環(huán)[5.5]十一烷Porcine PIR (Pirin) 檢測試劑盒
致癌基因C-Myc5-氯-2-羥基煙酸Porcine GP (Ai-Glycoprotein Aibody) 檢測試劑盒
膽囊收縮素85-氯-2-羥基煙酸Porcine F7 (Coagulation Factor Ⅶ) 檢測試劑盒
上皮鈣粘附分子二乙氨基三氟化硫Porcine TCC C5b-9 (Terminal Compleme Complex C5b-9) 檢測試劑盒
結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1二乙氨基三氟化硫Porcine FPB (Fibrinopeptide B) 檢測試劑盒
Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素二乙氨基三氟化硫Porcine NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) 檢測試劑盒
CSMD2蛋白Bosutinib (SKI-606)Porcine AQP-1 (Aquaporin 1) 檢測試劑盒
CSMD3蛋白PerampanelPorcine EAR2 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 2) 檢測試劑盒
中心體蛋白97kDa抗體枯草芽孢桿Rat GnRH (Gonadotropin-Reasing Hormone) Kit
卵孢單端孢Rat GRN (Granulin) Kit
紫色直絲鏈霉Rat GCP-2 (Granulocyte Chemotactic Protein 2) Kit
葡枝根霉Rat G-CSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor) Kit
中國臺灣根霉Rat Gzms-A (Granzymes A) Kit
彎孢Rat Gzms-B( Granzymes B) Kit
帚狀曲霉Rat GREM1 (GremLin 1) Kit
冬菇屬Rat GDF1 (Growth Differeiation Factor 1) Kit
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