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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鈣調蛋白結合轉錄激活因子1抗體 | CAMTA1 | BJ-K8252 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘撸瑢㈦s交瘤細胞移植到小鼠腹腔內,從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
AMPK alpha 1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1重樓皂甙C氫氧化釹(III)水合物Cyclin E 周期素E/原癌基因抗原
phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1重樓皂甙E氫氧化釹(III)水合物Dnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A) DNA甲基轉移酶-3α(抗原)
AMPK alpha 2 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2重樓皂甙F2-環(huán)己基乙基溴Cyclin C 周期素 C(抗原)
AMPK beta 1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1烏金甙2-環(huán)己基乙基溴CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降鈣素基因相關肽
phospho-AMPK beta 1(Ser108) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1獐牙菜甙4-(氯甲基)甲基CULLIN (Cdc53/CUL)
phospho-AMPK beta 1(Ser182) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1豆腐果甙DL-泛CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 細胞色素P450單氧化酶(多肽抗原)
Amylin 糖尿病相關肽/胰島淀粉樣肽石杉堿甲DL-泛CXorf36(uncharacterized protein Cxorf36 precursor) 脫羧酶蛋白體36 cxorf36抗原
beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽1-42 (C端)川陳皮素DL-泛Deltex-1 (DTX1) (Deltex protein 1)抗原
鈣粘附蛋白82-氯-1,3-二氟-4-Porcine FMOD (Fibromodulin) 檢測試劑盒
8號染色體開放閱讀框1922,3-己二酮Porcine TS/TYMS (Thymidylate Syhetase) 檢測試劑盒
21號染色體開放閱讀框872,3-己二酮Porcine PSAP (Prosaposin) 檢測試劑盒
21號染色體開放閱讀框912,6-二氯吡啶-3-羧酸Porcine CD23/FcεRII (Receptor II for the Fc Region of Immunoglobulin E) 檢測試劑盒
22號染色體開放閱讀框252,6-二氯吡啶-3-羧酸Porcine PAIg (Plaet Associated Immunoglobulins) 檢測試劑盒
20號染色體開放閱讀框1962,6-二氯吡啶-3-羧酸Porcine RAG-2 (Recombination Activating Gene 2) 檢測試劑盒
5號染色體開放閱讀框352,6-二氟甲酸Porcine Ext-N (N-Terminal Extein) 檢測試劑盒
20號染色體開放閱讀框1942,6-二氟甲酸Porcine c-I/NI3 (cardiac Troponin I) 檢測試劑盒
鈣調蛋白結合轉錄激活因子1抗體發(fā)酵性酵母Rat IGFBP5 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5) Kit
鹽水球Rat IGFBP6 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6) Kit
唐菖蒲青霉Rat ISR-β (Insulin Receptor Beta Subunit) Kit
發(fā)根根瘤Rat IL-35 (Ierleukin 35) Kit
毛栓孔Rat IGF-2 (Insulin Like Growth Factor 2) Kit
盤長孢*Rat IGFBP-1 (Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 1) Kit
庫氏類芽孢桿Rat IGFBP-2 (Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 2) Kit
鱗蓋紅菇Rat IGFBP-3 (Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 3) Kit
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優(yōu)點,產品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內受感染后早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
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