免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
Phospho-WNK1 (Thr60)  賴氨酸缺陷型蛋白激酶1三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員23-氯-4-氟酚Mouse HSP gp96 (Heat Shock Protein glycoprotein 96) 檢測(cè)試劑盒

WNK4  WNK4甲胎蛋白六甘Mouse HSF2 (Heat Shock Transcription Factor 2) 檢測(cè)試劑盒  

WNK3 protein  絲氨酸/蘇氨酸激酶家族成員的基因WNK3毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白六甘Mouse SHH (Hedgehog Homolog, Sonic) 檢測(cè)試劑盒  

W1  信號(hào)通路W1ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白23,5-二羥基甲Mouse HHIP (Hedgehog Ieracting Protein) 檢測(cè)試劑盒  

WDR26  心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3Poly(L-lactide) 1.0 dl/gMouse HLTF (Helicase Like Transcription Factor) 檢測(cè)試劑盒  

W3a  信號(hào)通路W3a酸性鈣調(diào)蛋白32-氨基-3-溴-5-氯吡啶Mouse MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) 檢測(cè)試劑盒

WIP1  原癌基因WIP1磷酸化CD156b2-氨基-3-溴-5-氯吡啶Mouse MMP-9 (Matrix Metalloproteinase-9) 檢測(cè)試劑盒

W9A  信號(hào)通路W9a乙脫氫酶54,6-二(二基膦)吩Mouse Pro-MMP-9 (Pro-Matrix Metalloproteinase-9) 檢測(cè)試劑盒

巨軸索蛋白GANMonkey NUP133 (Nucleoporin 133kDa) 檢測(cè)試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞基A2Monkey PGRP-S (Peptidoglycan Recognition Protein-S) 檢測(cè)試劑盒

高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1AMonkey DKK1 (Dickkopf Related Protein 1) 檢測(cè)試劑盒

自主生長因子1BMonkey MSP (Macrophage Stimulating Protein) 檢測(cè)試劑盒

GLCNE蛋白Monkey PSPN (Persephin) 檢測(cè)試劑盒

半乳糖凝集素9Monkey PL (Pancreatic Lipase) 檢測(cè)試劑盒

富含亮氨酸蛋白LRP130Monkey L-LDH (L-Lactate Dehydrogenase) 檢測(cè)試劑盒

蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑GBF1Monkey SYCN (Syncollin) 檢測(cè)試劑盒
通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體鏈霉種屬: Streptomyces│sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑活性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Aspergillus│candidus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.分離基物: 柞樹提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-31定期移植法

Rhizopus│stolonifer提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Sorangium│cellulosum分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no作為粘細(xì)聚酮合酶的的基因篩選庫，分析和篩選聚酮基因的多樣性培養(yǎng)基: 844生長條件: 30℃真空冷凍干燥法

Gliocladium│sp.分離基物: 千層塔植物根分離提供形式: 凍干物模式株: no未知培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28℃真空冷凍干燥法；定期移植法

Saccharomyces│cerevisiae分離基物: 生物樣/Stophanolepis cirrhifer/腸提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no共生微生物/魚類共生培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法

Fusarium│oxysporum提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃

赭褐鏈霉種屬: Streptomyces│umbrinus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑活性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃定期移植法