產(chǎn)品名稱：鈣熒光探針Fluo-8, AM

規(guī)格：1 mg/5×50 µg/10×50 µg/20×50 µg

貨號(hào)：BJP1190

分類：熒光核酸試劑
產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法　

可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

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檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

人腎上腺髓質(zhì)素 Kit品牌GAPDH (D4C6R) Mouse mAb (HRP Conjugate)100 ul

人血漿膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白 Kit品牌Rab9 (D22A6) Rabbit mAb100 ul

人晚期氧化蛋白產(chǎn)物 Kit說明書RPL5 (D5Q5X) Rabbit mAb100 ul

小鼠β-防御素2 Kit圖片RCC1 (D15H6) Rabbit mAb100 ul

小鼠γ-干擾素 Kit說明書4E-BP1 Control Cell Extracts100 ul

小鼠睪酮 Kit圖片β-Amyloid (D54D2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

小鼠肌鈣蛋白I Kit多少錢TIAR Antibody500 ul

小鼠腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子 Kit說明書SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers100 ul

小鼠血管緊張素II受體2 Kit說明書Cyclophilin A (D2Y4M) Rabbit mAb1 Kit

小鼠葉酸受體 Kit圖片Loading Control Antibody Sampler Kit1 Kit

柱式昆蟲 RNAout50 次說明書MYPT1 Antibody Sampler Kit100 ul

磁珠血液 DNAout50 次品牌HGK (D19H10) Rabbit mAb100 ul

豬表皮生長(zhǎng)因子（EGF）分析檢測(cè)試劑盒SRF (D71A9) XP® Rabbit mAb20 ul

小鼠絲氨酸轉(zhuǎn)肽酶抑制劑Kazal type 3（SPINK3）分析檢測(cè)試劑盒SRF (D71A9) XP® Rabbit mAb500 ul

小鼠凝血因子XIII A1（F13A1）分析檢測(cè)試劑盒SimpleChIP® Human TAP1 Promoter Primers100 ul

小鼠免疫球蛋白M（IgM）分析檢測(cè)試劑盒DUSP4/MKP2 (D9A5) Rabbit mAb100 ul

小鼠免疫球蛋白D（IgD）分析檢測(cè)試劑盒Anti-rabbit IgG (H+L) (DyLight™ 800 4X PEG Conjugate)500 ul
鈣熒光探針Fluo-8, AMAlternaria│brassicae (Berk.) Sacc.分離基物: 葉片病斑斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25-27存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Trametes│sanguinea斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃

Idiomarina│sediminum分離基物: 生物樣/淺水貝類凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 共附生微生物/貝類共生菌培養(yǎng)基: 472生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 保存HIV-1基因，載體pSVC21，蛋白酶失活，Vif失活培養(yǎng)基: CM0033生長(zhǎng)條件: 37C存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)

Acinetobacter│lwoffii分離基物: 砂土凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Monascus│pilosus分離基物: 丟糟凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀酒。培養(yǎng)基: CM0085生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Torulopsis│mogii分離基物: 稀醪凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 醬油生香培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 25-28存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

枯草芽孢桿菌種屬: Bacillus│subtilis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生產(chǎn)淀粉酶。培養(yǎng)基: CM0101生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Bacillus│smithii分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 50℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他