客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱：脂性Cy5.5 雙酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯

規(guī)格：1 mg/5 mg

貨號：BJP1162

分類：熒光核酸試劑

產(chǎn)品僅用于科研儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法　

可進(jìn)行相對，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等

實驗報告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告

儲存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

?

檢測步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

人葉酸 Kit說明書TNFRSF8/CD30 (E7E4D) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)300 ul

人乙酰 Kit多少錢Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb100 ul

人胰島素 Kit說明書Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb20 ul

人糖化血紅蛋白 Kit說明書Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb100 ul

人透明質(zhì)酸酶 Kit多少錢Phospho-YAP (Ser109) Antibody100 ul

小鼠III型前膠原肽 Kit品牌BMP7 Antibody100 ul

小鼠β淀粉樣蛋白1-42 Kit多少錢MEK1/2 (L38C12) Mouse mAb200 ul

小鼠促紅細(xì)胞生成素 Kit多少錢p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb20 ul

小鼠免疫球蛋白G Kit說明書p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb100 ul

小鼠去甲腎上腺素 Kit說明書p44/42 MAPK (Erk1/2) (L34F12) Mouse mAb10 ug

小鼠血小板活化因子 Kit圖片Human BMP-2100 ul

小鼠血小板生長因子 Kit說明書hnRNP K (A222) Antibody100µl

犬血管活性腸肽 Kit品牌TNFRSF8/CD30 (E7E4D) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)100 ul

兔白介素18 Kit品牌Integrin β3 Antibody100 ul

兔腎損傷分子-1 Kit多少錢Phospho-Glycogen Synthase (Ser641) (D4H1B) XP® Rabbit mAb20 ul

兔一氧化化氮 Kit品牌Phospho-Glycogen Synthase (Ser641) (D4H1B) XP® Rabbit mAb100 ul

細(xì)菌 RNAout100 次多少錢CAP1 (D2K3J) Rabbit mAb100 ul
脂性Cy5.5 雙酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯Escherichia│coli凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: T7 RNA polymerase生產(chǎn)培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；定期移植法

Rhizoctonia│solani斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Streptococcus oriloxodontae Shinozaki-Kuwahara et al. 2014模式菌株: 未知

Escherichia│coli分離基物: 死亡鵝凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;

Bacillus│licheniformis分離基物: 水樣/養(yǎng)豬場沼氣池沼液斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的生物轉(zhuǎn)化微生物/未經(jīng)過單菌驗證的反硝化菌培養(yǎng)基: 33生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Salinicola│sp.分離基物: 沉積物/TVMC沉積物/TVMC沉積物/TVMC沉積物(6-10cm)凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)基: 821生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物: 國槐枝干斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28存儲條件: 定期移植法

Clostridium│kluyveri分離基物: 酒窖斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于白酒增香。培養(yǎng)基: CM0172生長條件: 30℃存儲條件: 定期移植法；其他

Penicillium│funiculosum Thom分離基物: 谷物斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28存儲條件: 定期移植法
操作程序：

由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本（100mg組織或107個細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計合成（費(fèi)用另計）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實驗報告，包括實驗過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。