當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> 肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體 |
英文名稱 | Allergin-1 |
貨號 | BJ-K6737 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
TRPM2 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白(M亞家族)錨蛋白重復(fù)域28二乙氧基二基硅烷Mouse FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9) 檢測試劑盒
c/Troponin T 心肌特異性肌鈣蛋白T淋巴細(xì)胞相關(guān)AF4樣蛋白1-(3-氨基)-2-甲基哌啶Mouse FGFBP1 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 1) 檢測試劑盒
TSARG3 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白121-(3-氨基)-2-甲基哌啶Mouse FRS2 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2) 檢測試劑盒
TSARG4 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13AN,O-雙(*基硅烷基)ouse FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor SubstRate 3) 檢測試劑盒
TSARG6/DNAJB13 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9N,O-雙(*基硅烷基)三ouse FMOD (Fibromodulin) 檢測試劑盒
TSARG7 發(fā)生相關(guān)的新基因錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1AN,O-雙(*基硅烷基)三Mouse FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) 檢測試劑盒
CIDEB CIDEB脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2聚(1,4-丁二丁二酸)酯Mouse FN (Fibronectin) 檢測試劑盒
Tsg101 tsg101載脂蛋白L35-氟-2-胺Mouse FLNa (Filamin A) 檢測試劑盒
GTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白Monkey PICP (Procollagen I C-terminal Propeptide) 檢測試劑盒
絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2Monkey VIP (Vasoactive Iestinal Peptide) 檢測試劑盒
廣泛控制氨基酸合成1樣蛋白1Monkey C4BPα (C4 Binding Protein Alpha) 檢測試劑盒
β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶2Monkey CETP (Cholesteryl Ester Transfer Protein) 檢測試劑盒
磷酸化G蛋白激活內(nèi)向通道1Monkey CYPB (Cyclophilin B) 檢測試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白2Monkey IL-12 p40 (Ierleukin 12 p40) 檢測試劑盒
間隙連接蛋白10Monkey ApoA2 (Apolipoprotein A2) 檢測試劑盒
間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白Monkey IFN-β (Ierferon Beta) 檢測試劑盒
肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體Lactobacillus│plaarum分離基物: 發(fā)霉紅薯提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 6生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
Bacillus│subtilis subsp. subtilis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no蛋白酶(770U/ml)培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
黃直絲鏈霉種屬: Streptomyces│flavorectus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: yes模式株。對產(chǎn)朊圓酵母和稻瘟絲有溶作用。培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.分離基物: 組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no食用培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-30定期移植法
蘇云金芽孢桿種屬: Bacillus│thuringiensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28-32℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
奇異變形桿種屬: Proteus│mirabilis提供形式: 其他安全等級: 2模式株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃真空冷凍干燥法
鏈霉種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Isaria│cicadae Miq.分離基物: 子實(shí)體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 17生長條件: 28定期移植法
Trametes│sp.分離基物: 闊腐提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0017生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
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