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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> 蛋白激酶B
β-肌動(dòng)蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 蛋白激酶B |
英文名稱 | AKT1 |
貨號(hào) | BJ-K6688 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
Phospho-SirT1 (Ser27) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1磷酸化失調(diào)癥蛋白13,3'4,4'-二甲酮四羧酸二酐Mouse FGF6 (Fibroblast Growth Factor 6) 檢測(cè)試劑盒
Phospho-SirT1 (Ser47) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1脊髓小腦失調(diào)癥蛋白13,3'4,4'-二甲酮四羧酸二酐Mouse BAFFR (B-Cell Activation Factor Receptor) 檢測(cè)試劑盒
Skp2 細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白3,3'4,4'-二甲酮四羧酸二酐Mouse Bcl-2 (B-Cell Leukemia/Lymphoma 2) 檢測(cè)試劑盒
SLC4A4 碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1N-甲基二烯基胺Mouse Bcl-3 (B-Cell CLL/Lymphoma 3) 檢測(cè)試劑盒
Slc4a7/Nbcn1 碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1N-甲基二烯基胺Mouse BAK1 (BCL2 Aagonist/Killer 1) 檢測(cè)試劑盒
NGALR/Slc22A17 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白22A17磷酸化活化復(fù)制因子22-氨基-3,5-二溴吡Mouse Bax (Bcl-2 Associated X Protein) 檢測(cè)試劑盒
SLC24A5 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5磷酸化鈉ATP酶蛋白a12-氨基-3,5-二溴吡Mouse BMF (Bcl-2 Modifying Factor) 檢測(cè)試劑盒
Slc26a5 Slc26a5磷酸化鈉ATP酶蛋白a12-氨基-3,5-二溴吡Mouse BAD (Bcl-2 Associated Death Promoter) 檢測(cè)試劑盒
原鈣粘蛋白γA1Monkey ADIPOR2 (Adiponectin Receptor 2) 檢測(cè)試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體70Monkey TM (Thrombomodulin ) 檢測(cè)試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體71Monkey PP (Pancreatic Polypeptide) 檢測(cè)試劑盒
谷氨酸受體δ2/GluR-δ2Monkey NUP98 (Nucleoporin 98kDa) 檢測(cè)試劑盒
血型糖蛋白A/涎糖蛋白Monkey GA (Glycated Albumin) 檢測(cè)試劑盒
谷氨酸脫羧酶67Monkey PI3K2α (Phosphoinositide-3-Kinase Class-2-Alpha Polypeptide) 檢測(cè)試劑盒
生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因45Monkey ATGA/TGAB (Ai-Thyroid-Globulin Aibody) 檢測(cè)試劑盒
胃泌素抑制肽Monkey CTX-II (Cross Linked C-opeptide of Type II Collagen) 檢測(cè)試劑盒
蛋白激酶BEscherichia│coli分離基物: 雞肝臟提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式株: no研究教學(xué)分類培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37真空冷凍干燥法;
Streptomyces│sp.分離基物: 腐殖質(zhì)土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Flavobacterium│sp.分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no污染物降解微生物/潛在石油烴類降解培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
柱孢犁頭霉根狀變種種屬: Absidia│cylindrospora var. rhizomorpha提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: yes模式株培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Arthrobacter│subterraneus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物模式株: no培養(yǎng)基: 831生長(zhǎng)條件: 37℃真空冷凍干燥法
Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物: 葉部提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25定期移植法
Staphylococcus│sp.分離基物: 鹽堿土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 331生長(zhǎng)條件: 37℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│funiculus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
Acinetobacter│lwoffii分離基物: 沉積物/表層沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no潛在的有機(jī)污染物降解/分離自原油富集群培養(yǎng)基: 472生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
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