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客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱:脂性Cy3,尸胺
規(guī)格:1 mg/5 mg
貨號:BJP1152
分類:熒光核酸試劑
產(chǎn)品僅用于科研儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
·電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時,熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
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檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9 Kit多少錢Keratin 8/18 (C51) Mouse mAb100 ul
人白介素-1β Kit圖片TRIM33 (D7U4F) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
人肝型脂肪酸結(jié)合蛋白 Kit多少錢Phospho-PDGF Receptor α (Tyr1018) Antibody20 ul
人抗嗜中性粒細(xì)胞胞漿抗體 Kit說明書Phospho-PDGF Receptor α (Tyr1018) Antibody100 ul
人硫酸類肝素 Kit多少錢Keratin 18 (DC10) Mouse mAb20 ul
人免疫球蛋白D Kit多少錢Keratin 18 (DC10) Mouse mAb100 ul
人腦腸肽 Kit說明書Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) (C63G6) Rabbit mAb20 ul
人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78 Kit說明書Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) (C63G6) Rabbit mAb100 ul
人生長抑素 Kit多少錢Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (28B10) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul
人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白G2 KitPhospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (28B10) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100µl
小鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 Kit說明書ROBO2 (E4M6D) Rabbit mAb100 ul
兔CXC趨化因子配體16CXCL16 Kit圖片TNFRSF17/BCMA (E6D7B) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
兔II 型膠原C 端肽CTX-2 Kit多少錢HS1 Antibody (Rodent Specific)100 ul
柱式真菌 RNAout50 次品牌CD11c (D3V1E) XP® Rabbit mAb20 ul
豬白介素12(IL-12/P70)分析檢測試劑盒CD11c (D3V1E) XP® Rabbit mAb100 ul
小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)分析檢測試劑盒Keratin 19 (BA17) Mouse mAb20 ul
小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)分析檢測試劑盒Keratin 19 (BA17) Mouse mAb100 ul
脂性Cy3,尸胺產(chǎn)鼻疽分支桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium farcinogenes凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28-30存儲條件: 定期移植法
Saccharomyces│cerevisiae斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 面包酵母。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
戈登分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium gordonae凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
白色假絲酵母種屬: Candidaalbicans(Robin)Berkhout安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 13生長條件: 28℃
嗜蟲沙雷氏菌種屬: Serratia│entomophila分離基物: 天牛腸道凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料用纖維素酶、植酸酶、木聚糖酶等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
Pleurotus│cystidiosus斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
Mesorhizobium│tianshanense分離基物: 根瘤斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0063生長條件: 28-30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
Arenimonas│oryziterrae分離基物: 土壤凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 848生長條件: 4℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
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