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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
20號染色體開放閱讀框94抗體 | C20orf94 | BJ-K8178 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘撸瑢㈦s交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
優(yōu)級胎牛血清 綠原酸1-溴-2,3,5,6-四氟JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2) 蛋白質酪氨酸激酶JAK-2抗原
新綠原酸(5-咖啡酰奎寧酸)1-溴-2,3,5,6-四氟phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗原
ES級別胎牛血清隱綠原酸(4-咖啡??鼘幩幔?-溴-2-JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3) c-Jun氨基末端激酶1/3多肽抗原
新生牛血清異綠原酸A(3,5-二咖啡酰奎寧酸)順-二氯雙(三基膦)鉑(II), Pt minphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 磷酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原
異綠原酸B(3,4-二咖啡??鼘幩幔╉?二氯雙(三基膦)鉑(II), Pt minKi-67(Aigen ideified by monoclonal aibody Ki 67) Ki-67 Aigen
馬血清異綠原酸C(4,5-二咖啡酰奎寧酸)烯基三基溴化磷Klf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原
1-咖啡??鼘幩嵯┗寤譸hospho-KLF5/Krueppel-like factor 5 (pSer272) 磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原
熱滅活馬血清洋薊素(1,3-二咖啡酰奎寧酸)酚三水合物phospho-Klf5/CKLF/Kruppel like factor 5, Human, mo, rat, horse, bovine, rabbit, pig, dog 磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原
Phospho-MARCKS (Ser162) /FITC 熒光素標記磷酸化氨酸蛋白激酶C底物MarcksIgG貓眼綜合征染色體候選基因22',3'-異叉鳥苷Porcine EED (Embryonic Ectoderm Developme) 檢測試劑盒
MAPKK1 /FITC 熒光素標記絲裂原活化蛋白激酶激酶1IgG1號染色體開放閱讀框1462',3'-異叉鳥苷Porcine CENPF (Ceromere Protein F) 檢測試劑盒
MAPKK2 /FITC 熒光素標記絲裂原活化蛋白激酶激酶2IgG1號染色體開放閱讀框1502-溴-4-氟甲Porcine D4R/DRD4 (Dopamine Receptor D4) 檢測試劑盒
SEK1/MKK4/FITC 熒光素標記絲裂原活化蛋白激酶激酶4IgG1號染色體開放閱讀框1562-溴-4-氟甲Porcine CAMK2α (Calcium/Calmodulin Depende Protein Kinase II Alpha) 檢測試劑盒
Phospho-SEK1/MKK4 (Ser80)/FITC 熒光素標記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4IgG1號染色體開放閱讀框1592-溴-4-氟甲Porcine DSG-E1 (Desmogleins 1) 檢測試劑盒
Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) /FITC 熒光素標記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4IgG1號染色體開放閱讀框162Tris(4,7-diphenyl-1,10-phenahroline)ruthenium(II) dichloride complexPorcine PAI1 (Plasminogen Activator Inhibitor 1) 檢測試劑盒
Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)/FITC 熒光素標記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4IgG1號染色體開放閱讀框1632-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶Porcine MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) 檢測試劑盒
p44/42 MAPK (phospho Thr202/Tyr204) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2IgG1號染色體開放閱讀框1222-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶Porcine NEF3 (Neurofilame 3) 檢測試劑盒
20號染色體開放閱讀框94抗體長根靜灰球Rat BNP (Brain Natriuretic Peptide) Kit
虎掌*Rat BRAK (Breast And Kidney Expressed Chemokine) Kit
枯草芽孢桿Rat VE-Cadherin (Vascular Endothial Cadherin) Kit
傳染性支氣管炎病Rat NCAD (Neural Cadherin) Kit
FormosaRat CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) Kit
枯草芽孢桿Rat CAN (Calcineurin) Kit
隱花青鵝膏Rat CGRP (Calcitonin Gene Rated Peptide) Kit
艾高夫氏亮Rat β-Lg (Beta-Lactoglobulin) Kit
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
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