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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>熒光核酸試劑>> 1 mg/5 mg脂性Cy5雙酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯
產(chǎn)品名稱(chēng):脂性Cy5雙酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯
規(guī)格:1 mg/5 mg
貨號(hào):BJP1156
分類(lèi):熒光核酸試劑
產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
染料法
探針?lè)ā?/span>
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
·電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
·溶解曲線(xiàn) ·擴(kuò)增曲線(xiàn)
·完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針?lè)ǎ?/span>
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。
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檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱(chēng)、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線(xiàn);
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針?lè)ǎ?,可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線(xiàn)、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
小鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)UNC1999100 ul
小鼠表皮細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)MAML1 Antibody100 ul
MEM α(含核苷、脫氧核苷)現(xiàn)貨供應(yīng)Dysbindin Antibody100 ul
DMEM高糖 (不含丙酮酸鈉,含HEPES)現(xiàn)貨供應(yīng)CTMP Antibody100 ul
DMEM低糖報(bào)價(jià)MPC2 (D4I7G) Rabbit mAb100 ul
櫟癭酸6812-81-3實(shí)驗(yàn)步驟MAML2 Antibody100 ul
斑蝥素56-25-7*Sox9 (D8G8H) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
查斯曼林實(shí)驗(yàn)方法Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516) (C35G9) Rabbit mAb20 ul
丹參素22681-72-7實(shí)驗(yàn)方法Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516) (C35G9) Rabbit mAb100 ul
牛磺鵝去氧膽酸516-35-8 實(shí)驗(yàn)方法Histone H3 (D2B12) XP® Rabbit mAb (ChIP Formulated)100 ul
佛司可林66575-29-9 實(shí)驗(yàn)步驟Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) (C50F3) Rabbit mAb20 ul
高良姜素548-83-4 實(shí)驗(yàn)步驟Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) (C50F3) Rabbit mAb500 ul
綠原酸327-97-9價(jià)格CD3 (UCHT1) Mouse mAb (PE Conjugate)100 ul
牡荊素鼠李糖苷76135-82-5 *Exportin-1/CRM1 (D6V7N) Rabbit mAb100 ul
女貞苷 260413-62-5 *A20/TNFAIP3 Antibody100 ul
青蒿乙素50906-56-4 實(shí)驗(yàn)步驟β-Catenin (L54E2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
去氫木香內(nèi)酯477-43-0*Tri-Methyl-Histone H3 (Lys36) (D5A7) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
脂性Cy5雙酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯嗜根考克氏菌(藤黃八疊球菌)種屬: Kocuria rhizophila凍干粉安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 土霉素測(cè)定菌培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。生長(zhǎng)條件: 30-37℃,好氧,曾用名藤黃八疊球菌
Bacillus│subtilis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0003生長(zhǎng)條件: 35-37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Mycobacterium│tuberculosis凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Colletotrichum│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
Absidia│glauca凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Shigella│sp.分離基物: 短鰭紅娘魚(yú)腸胃道斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料用木聚糖酶、葡聚糖酶、蛋白酶、植酸酶等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
Pseudomonas│alcaliphila分離基物: 沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生物轉(zhuǎn)化微生物/固氮菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Cunninghamella│echinulata var. echinulata凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Paecilomyces│lilacinus (Thom) Samson斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法
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