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單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
2號染色體開放閱讀框16抗體 | C2orf16 | BJ-K8184 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導(dǎo)細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
B群鏈球菌顯色培養(yǎng)基丹參素鈉2-乙基-4-甲基噻唑MDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗原
ESBL顯色培養(yǎng)基冬凌草甲素2-異基-4-甲基噻唑MDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗原
KPC顯色培養(yǎng)基輔酶Q102-異基-4-甲基噻唑MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2) 肌細胞增強因子2抗原
CTX-M顯色培養(yǎng)基粉防己堿(漢防己甲素)2,6-二氨基-4-氯嘧啶Mfn1 (Mitofusin1) 線粒體融合蛋白1
Agar 瓊脂粉防己諾林堿(漢防已乙素)2,6-二氨基-4-氯嘧啶MT(metallothionein) 金屬硫蛋白抗原
Agar 瓊脂粉鬼臼素3-氨基-1-MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 層粘連蛋白受體1
L-Arginine L-精氨酸葛根素3-氨基-1-MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗原(C端)
L-Aspartic acid L-天門冬氨酸黃芪總皂苷LicofeloneMK(Midkine) 中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗原
MEF2A/FITC 熒光素標記肌細胞增強因子2IgG1號染色體開放閱讀框216(+)-Biotin-PEG24-NHS EsterPorcine DAT (Dopamine Transporter) 檢測試劑盒
Phospho-MEF2A (Thr312) /FITC 熒光素標記磷酸化肌細胞增強因子2IgG1號染色體開放閱讀框432-氯-4,6-二氟胺Porcine EAR1 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 1) 檢測試劑盒
Phospho-MEF2A (Ser408) /FITC 熒光素標記磷酸化肌細胞增強因子2IgG1號染色體開放閱讀框502-氯-4,6-二氟胺Porcine BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) 檢測試劑盒
Megsin/SER—PINB7 /FITC 熒光素標記絲氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑制劑B7IgG1號染色體開放閱讀框49呋喃酮Porcine DCLK1 (Doublecortin Like Kinase 1) 檢測試劑盒
MEK1/ MAPKK 1/FITC 熒光素標記MEK1/ MAPKK 1IgG1號染色體開放閱讀框53呋喃酮Porcine SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) 檢測試劑盒
phospho-MEK1 (Thr286) /FITC 熒光素標記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1IgG1號染色體開放閱讀框54二甲基三硫Porcine Smad7/MADH7 (Mothers Against Decapeaplegic Homolog 7) 檢測試劑盒
Phospho-MEK1/2 (Ser217/221)/FITC 熒光素標記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2IgG1號染色體開放閱讀框55二甲基三硫Porcine SIGLEC10 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 10) 檢測試劑盒
Phospho-MEK1/2 (Ser221)/FITC 熒光素標記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2IgG1號染色體開放閱讀框564-叔丁基肼鹽酸鹽Porcine TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) 檢測試劑盒
2號染色體開放閱讀框16抗體小孢根霉須狀變種Rat CTSK (Cathepsin K) Kit
竹喙球Rat CTSL (Cathepsin L) Kit
擬莖點霉Rat CDX2 (Caudal Type Homeobox Transcription Factor 2) Kit
乳桿屬Rat CAV-1 (Caveolin-1) Kit
黃色短桿Rat C/EBPδ (CCAAT/Enhancer Binding Protein data,C/EBPδ) Kit
大腸埃希Rat CENPA (Ceromere Protein A) Kit
黑附球Rat CENPB (Ceromere Protein B) Kit
棒桿屬Rat CENPE (Ceromere Protein E) Kit
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