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客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱:脂性Cy5,尸胺
規(guī)格:1 mg/5 mg
貨號:BJP1158
分類:熒光核酸試劑
產(chǎn)品僅用于科研儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
·電泳圖 ·標準曲線
·溶解曲線 ·擴增曲線
·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
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檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
L-異亮氨酸使用說明書Rab5 (E6N8S) Mouse mAb100 ul
CBZ-L-蘇氨酸實驗步驟α-Smooth Muscle Actin (1A4) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul
L-脯氨醇使用說明書HSP70 (D1M6J) Mouse mAb1 Kit
BOC-D-天冬酰實驗步驟Autophagy Induction (ULK1 Complex) Antibody Sampler Kit100 ul
BOC-L-絲氨酸使用說明書DHX29 (G63) Antibody500 ul
L-叔亮氨酸保存SimpleChIP® Human Sox2 Promoter Primers100 ul
聚乙烯樹脂使用說明書Vinculin Antibody20 ul
SDS-PAGE蛋白質(zhì)中分子量保存Vinculin Antibody100 ul
丁基瓊脂糖凝膠4B使用說明書Rac1/Cdc42 Antibody20 ul
纖維素透析袋實驗步驟Rac1/Cdc42 Antibody1 Kit
三道定時鐘價格PTMScan® Phospho-MAPK/CDK Substrate Motif (PXS*P and S*PXK/R) Kit1Kit
硅膠HF254價格FastScan™ Phospho-IκBα (Ser32) Kit100 ul
甲砜霉素保存SMAD4 (D3R4N) XP® Rabbit mAb20 ul
鏈霉蛋白酶價格SMAD4 (D3R4N) XP® Rabbit mAb500 ul
腺苷脫氨酶使用說明書SimpleChIP® Mouse Oct-4 Promoter Primers100 ul
溶壁微球菌細胞實驗步驟DPYD (D35A8) Rabbit mAb100 ul
變旋酶使用說明書TESK1 (D49D4) Rabbit mAb20 ul
脂性Cy5,尸胺Mesorhizobium│huakuii分離基物: 分離自黃棕壤中生長的紫云英根瘤凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于研究質(zhì)粒之間的相互作用培養(yǎng)基: 63生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Bacillus│subtilis凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生產(chǎn)肌苷培養(yǎng)基: CM0007生長條件: 32℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Pseudomonas│vancouverensis凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Aspergillus│terreus Thom分離基物: 四川杜鵑斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 304生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Escherichia│coli凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Trametes│ochracea斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 17生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Saccharomyces│cerevisiae凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于葡萄酒生產(chǎn)培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Thalassolituus│sp.分離基物: 水樣/上層海水斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海細菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 20-25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
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溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。