客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱：脂性Cy5,尸胺

規(guī)格：1 mg/5 mg

貨號：BJP1158

分類：熒光核酸試劑

產(chǎn)品僅用于科研儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法　

可進(jìn)行相對，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

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檢測步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

L-異亮氨酸使用說明書Rab5 (E6N8S) Mouse mAb100 ul

CBZ-L-蘇氨酸實(shí)驗(yàn)步驟α-Smooth Muscle Actin (1A4) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

L-脯氨醇使用說明書HSP70 (D1M6J) Mouse mAb1 Kit

BOC-D-天冬酰實(shí)驗(yàn)步驟Autophagy Induction (ULK1 Complex) Antibody Sampler Kit100 ul

BOC-L-絲氨酸使用說明書DHX29 (G63) Antibody500 ul

L-叔亮氨酸保存SimpleChIP® Human Sox2 Promoter Primers100 ul

聚乙烯樹脂使用說明書Vinculin Antibody20 ul

SDS-PAGE蛋白質(zhì)中分子量保存Vinculin Antibody100 ul

丁基瓊脂糖凝膠4B使用說明書Rac1/Cdc42 Antibody20 ul

纖維素透析袋實(shí)驗(yàn)步驟Rac1/Cdc42 Antibody1 Kit

三道定時(shí)鐘價(jià)格PTMScan® Phospho-MAPK/CDK Substrate Motif (PXS*P and S*PXK/R) Kit1Kit

硅膠HF254價(jià)格FastScan™ Phospho-IκBα (Ser32)  Kit100 ul

甲砜霉素保存SMAD4 (D3R4N) XP® Rabbit mAb20 ul

鏈霉蛋白酶價(jià)格SMAD4 (D3R4N) XP® Rabbit mAb500 ul

腺苷脫氨酶使用說明書SimpleChIP® Mouse Oct-4 Promoter Primers100 ul

溶壁微球菌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟DPYD (D35A8) Rabbit mAb100 ul

變旋酶使用說明書TESK1 (D49D4) Rabbit mAb20 ul
脂性Cy5,尸胺Mesorhizobium│huakuii分離基物: 分離自黃棕壤中生長的紫云英根瘤凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于研究質(zhì)粒之間的相互作用培養(yǎng)基: 63生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Bacillus│subtilis凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生產(chǎn)肌苷培養(yǎng)基: CM0007生長條件: 32℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Pseudomonas│vancouverensis凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Aspergillus│terreus Thom分離基物: 四川杜鵑斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法

Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 304生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

Escherichia│coli凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Trametes│ochracea斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 17生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Saccharomyces│cerevisiae凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于葡萄酒生產(chǎn)培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Thalassolituus│sp.分離基物: 水樣/上層海水斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海細(xì)菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 20-25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。