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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
膜粘連蛋白5抗體 | Annexin V | BJ-K6702 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導(dǎo)細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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多克隆抗體定制:
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
phospho-STAT1 (Ser727) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1α-1抗胰糜蛋白酶4-溴-2,6-二胺Mouse CBX3 (Chromobox Homolog 3) 檢測試劑盒
STAT2 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2α-1抗胰蛋白酶4-溴-2,6-二胺Mouse CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) 檢測試劑盒
Phospho-Stat2 (Tyr690) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2ATP結(jié)合蛋白家族6Grubbs 2 代催化劑Mouse CHD5 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 5) 檢測試劑盒
STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1Grubbs 2 代催化劑Mouse CF (Ciliary Neurotrophic Factor) 檢測試劑盒
phospho-STAT3 (Thr705) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3脂聯(lián)素受體2Grubbs 2 代催化劑Mouse CROP (Cisplatin Resistance Associated Overexpressed Protein) 檢測試劑盒
phospho-STAT3 (Ser727) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3ANGEL1蛋白L-氨酸芐酯鹽酸鹽Mouse C-jun 檢測試劑盒
phospho-STAT5a(Tyr694) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5aANGEL2蛋白L-氨酸芐酯鹽酸鹽Mouse CC17 (Clara Cell Protein) 檢測試劑盒
phospho-STAT6(Tyr641) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6ANKLE2蛋白L-氨酸芐酯鹽酸鹽Mouse CD3 (Cluster of differeiation 3) 檢測試劑盒
高爾基體磷蛋白6Monkey PA2G4 (Proliferation Associated Protein 2G4) 檢測試劑盒
高爾基SNAP受體復(fù)合物1Monkey N4 (Netrin 4) 檢測試劑盒
谷氨酸草酰轉(zhuǎn)氨酶1樣蛋白1Monkey fT3 (Free Triiodothyronine) 檢測試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體52Monkey BNP (Brain Natriuretic Peptide) 檢測試劑盒
核膜糖蛋白210Monkey LCN2 (Lipocalin 2) 檢測試劑盒
GADD153Monkey Smad7/MADH7 (Mothers Against Decapeaplegic Homolog 7) 檢測試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體57Monkey BMF (Bcl-2 Modifying Factor) 檢測試劑盒
GSK-3結(jié)合蛋白FRAT2Monkey C1q (Compleme 1q) 檢測試劑盒
膜粘連蛋白5抗體谷氨酸棒桿種屬: Corynebacterium│glutamicum提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no產(chǎn)L-亮氨酸。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃真空冷凍干燥法;定期移植法
Termitomyces│striatus (Beeli.) Heim分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28定期移植法
Trichoderma│koningii提供形式: 凍干物模式株: no分解纖維素(作飼料)培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28℃真空冷凍干燥法;定期移植法
Staphylococcus simulans提供形式: 凍干粉、斜面安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15min。生長條件: 37℃,好氧生長特性: 在Baird-Park瓊脂平板上,落灰色、扁平,落較大,周圍有輕微渾濁帶,有明顯透明圈;在血瓊脂平板上,落白色,干燥,有溶血圈。凍干粉、斜面,4℃冷藏
釀酒酵母種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no經(jīng)CICC 1303高溫選育而來,釀造酒精。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Eimeria│maxima分離基物: 雞的糞便提供形式: 其他安全等級: 2模式株: no可供教學(xué)科研等使用。培養(yǎng)基: 0生長條件: 37液氮超低溫凍結(jié)法;其他;
Aspergillus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no分類學(xué)及植物內(nèi)共生真的研究培養(yǎng)基: 2生長條件: 28℃真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
Rhizobium│leguminosarum分離基物: 根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no用于分類學(xué)和遺傳學(xué)研究,教學(xué)上也有應(yīng)用,同時也篩選與豆科植物共生固氮的高效株用于實際生產(chǎn)。培養(yǎng)基: 0063生長條件: 28-30℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
Penicillium│oxalicum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
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