免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

?
抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
?
抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
STAT5B aibody90 kDaP51692Human

STAT6 aibody100-110 kDaP42226Human, Mouse, Rat

STAT6 aibody100-110 kDaP42226Human, Mouse, Rat

STATH aibody7-10 kDaP02808Human, Mouse

Stathmin aibodyRefer to figuresP16949Human, Mouse

Stathmin aibody18 kDa P16949Human, Mouse

STAU1 aibody58 kDaO95793Human, Mouse, Rat

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶5輕鏈抗體別 名 Gamma glutamyl transpeptidase rated enzyme; Gamma glutamyltranspeptidase 5; Gamma-glutamyl transpeptidase-rated enzyme; Gamma-glutamyltransferase 5 heavy chain; Gamma-glutamyltransferase-like activity 1; Gamma-glutamyltranspeptidase 5; GGT 5; GGT R; GGT-r; GGT5; GGT5_HUMAN; DKFZP566O011; GGTLA1; Glutathione hydrolase 5; Leukotriene-C4 hydrolase; Gamma-glutamyltransferase 5 light chain.

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶7輕鏈抗體別 名 Gamma-glutamyltransferase 7 light chain; D20S101; dJ18C9.2; Gamma glutamyltransferase 4; Gamma glutamyltransferase 7; Gamma glutamyltransferase like 3; Gamma glutamyltransferase like 5; Gamma glutamyltranspeptidase 7; Gamma glutamyltranspeptidase like 3; GGT 7; GGT4; GGTL3; GGTL5; GGT7_HUMAN.

溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體別 名 N-acetylglucosamine-1-phosphotransferase subunit alpha; EC=2.7.8.17; GlcNAc-1-phosphotransferase subunits alpha/beta; GNPTA; GNPTA_HUMAN; Gnptab; KIAA1208; Stealth protein GNPTAB; UDP-N-acetylglucosamine-1-phosphotransferase subunits alpha/beta.
程序性死亡配體2抗體腸炎沙門氏種屬: Salmonella eeritidis提供形式: 西林瓶，定性片安全等級(jí): 2模式株: no研究；教學(xué)；分類。培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件: 37℃，好氧。生長(zhǎng)特性: 革蘭氏陰性桿，大小為0.6-2.0μm × 1.0-4.0μm，通常以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)；兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高；不能利用檸檬酸鹽作為碳源；產(chǎn)氣，大多數(shù)株不產(chǎn)生H2S，發(fā)酵阿拉伯糖而不發(fā)酵木糖，僅對(duì)人致病，能夠引起與傷寒類似的癥狀。-20℃避光保存；運(yùn)輸條件：冰袋運(yùn)輸。

Alternaria│tenuissima提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃

Trichoderma│sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 18-26℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Erythrobacter│citreus分離基物: 沉積物/土黃色沉積物上覆水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no1、海洋石油污染生物修復(fù)； 2、生物活性物質(zhì)篩選。培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Vibrio│sp.分離基物: 生物樣/赤點(diǎn)石斑魚腸體內(nèi)容物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no共生微生物/赤點(diǎn)石斑魚腸道共生培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Asaia│sp.分離基物: 野生諾尼果內(nèi)提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: CM0033生長(zhǎng)條件: 28℃-80℃冰箱凍結(jié)法

Chromohalobacter│sp.分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no微生物/高鹽（鹽度20%-26%）培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 20-25℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Xahomonas│campestris pvar. juglandis (Pammel) Dowson分離基物: 枝提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 141生長(zhǎng)條件: 30真空冷凍干燥法；定期移植法

Nocardioides│terrigena分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 832生長(zhǎng)條件: 18℃真空冷凍干燥法