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免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | ADCK2蛋白抗體 |
英文名稱 | ADCK2 |
貨號 | BJ-K6413 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
線粒體核糖體蛋白L30多克隆抗體100 ul RM30 Polyclonal Antibody
線粒體核糖體蛋白L28多克隆抗體100 ul RM28 Polyclonal Antibody
線粒體核糖體蛋白L27多克隆抗體5 mg RM27 Polyclonal Antibody
線粒體核糖體蛋白L23多克隆抗體100 ul RM23 Polyclonal Antibody
線粒體核糖體蛋白L2多克隆抗體100 ul RM02 Polyclonal Antibody
線粒體核糖體蛋白L19多克隆抗體100 ul RM19 Polyclonal Antibody
線粒體核糖體蛋白L1多克隆抗體100 ul RM01 Polyclonal Antibody
線粒體翻譯起始因子2多克隆抗體100 ul IF2M Polyclonal Antibody
線粒體促凋亡蛋白Smac/DBLOH多克隆抗體100 ul DBLOH Polyclonal Antibody
線粒體G延伸因子1多克隆抗體100 ul EFGM Polyclonal Antibody
線粒體DNA指導的RNA聚合酶多克隆抗體100 ul RPOM Polyclonal Antibody
銜接因子相關蛋白復合體2,μ1亞基多克隆抗體20 ul AP2M1 Polyclonal Antibody
銜接因子相關蛋白復合體1,γ1亞基多克隆抗體100 ul AP1G1 Polyclonal Antibody
酰基羧酸水解酶(中性粒細胞)多克隆抗體100 ul AOAH Polyclonal Antibody
?;o酶A氧化酶3多克隆抗體100 ul ACOX3 Polyclonal Antibody
ADCK2蛋白抗體果生鏈核盤菌Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..脲氣球菌
地衣芽孢桿菌Homo sapiens, human黑色葡萄穗霉
白金針菇Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..熱黃擬無枝酸菌
大腸埃希氏菌Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Amycolatopsisalbidoflavus
白黃側(cè)耳frozen巨孢鏈霉菌
微小桿菌Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..利迪鏈霉菌
蘇云金芽孢桿菌Streptomyces clulosae (Krainsky) Waksman ..鏈霉菌
藤黃類諾卡氏菌Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..TG1 Strain
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