免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
GPR109A/HM74A  G蛋白偶聯(lián)受體109A紅大戟3-溴-4-氟Human PRF1 (Perforin 1/Pore-Forming Protein) 檢測試劑盒

GRK1  G蛋白偶合受體激酶1紅芪3-溴-4-氟Human FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) 檢測試劑盒

GRK2/BARK1  G蛋白偶合受體激酶2卷柏(墊狀卷柏）癸二酸銨Human VMA (Vanillylmandelic Acid) 檢測試劑盒

GRIM19  干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因麥芽癸二酸銨Human TGM1 (Transglutaminase 1, Keratinocyte) 檢測試劑盒

GRM1  促代謝型谷氨酸受體1花椒9-芐基咔唑Human PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) 檢測試劑盒

GRM2/GLUR2  促代謝型谷氨酸受體2蘆根3-甲基-5-氯并噻吩Human EPHA10 (Ephrin Type A Receptor 10) 檢測試劑盒

Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr869/873/876)  磷酸化促代謝型谷氨酸受體2扶芳藤3-甲基-5-氯并噻吩Human ERβ (Estrogen Receptor Beta) 檢測試劑盒

Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr876)   磷酸化促代謝型谷氨酸受體2伸筋草4-溴-2,5-二氯酚Human ERα (Estrogen Receptor Alpha) 檢測試劑盒

肌動蛋白解聚因子Porcine CPN10 (Chaperonin 10) 檢測試劑盒

甘油二酯酰基轉(zhuǎn)移酶2Porcine GTF2F1 (General Transcription Factor IIF, Polypeptide 1) 檢測試劑盒

DHX15蛋白Porcine SHC/SLP-76 (SH2-Coaining Protein) 檢測試劑盒

DIAPH2蛋白Porcine TFF3 (Trefoil Factor 3, Iestinal ) 檢測試劑盒

磷酸化蓬亂蛋白2Porcine CCSA-2 (Colon Cancer Specific Aigen-2) 檢測試劑盒

W通路抑制因子2Porcine IL-3 (Ierleukin 3) 檢測試劑盒

磷酸化B淋巴細(xì)胞銜接分子DAPP1Porcine C4BPβ (C4 Binding Protein Beta) 檢測試劑盒

磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白Porcine α1-AT (Alpha 1-Aitrypsin) 檢測試劑盒
環(huán)核苷酸門控陽離子通道蛋白CNG-1β抗體豇豆慢生根瘤Porcine CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1)  Kit

聚生殼Porcine TSPAN30 (Tetraspanin 30)  Kit

黑曲霉Porcine RANκ (Receptor Activator of  Nuclear Factor Kappa B)  Kit

有柄樹舌Porcine GAL9 (Galectin 9 )  Kit

豌豆根瘤Porcine SA (Sialic Acid)  Kit

褐黃木耳（琥珀木耳）Porcine OPN (Osteopoin)  Kit

芥黃蜜環(huán)Porcine CEP110 (Cerosomal Protein 110kDa)  Kit

BL21(DE3)starPorcine PYGM (Glycogen Phosphorylase, Muscle)  Kit