免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
詳細介紹：

?
抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
?
抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
STRA6 aibodyQ9BX79Human

STRADB aibody28-31 kDa; 38-42 kDaQ9C0K7Human, Mouse, Rat

STRAP aibody39 kDaQ9Y3F4Human, Mouse, Rat

STRBP aibody74 kDaQ96SI9Human, Mouse, Rat

STRN aibody120 kDa, 80 kDaO43815Human, Mouse, Rat

STS aibody63 kDa-65 kDaP08842Human, Mouse, Rat

STT3A aibody100 kDaP46977Human, Mouse, Rat

多發(fā)性肌炎/硬皮病自身抗原2抗體別 名 Autoaigen PM/Scl 2; Exosc10; Exosome compone 10; EXOSX_HUMAN; P100 polymyositis scleroderma overlap syndrome associated autoaigen; P100 polymyositis-scleroderma overlap syndrome-associated autoaigen; p2; p3; p4; PM Scl; PM/Scl 100; PM/Scl-100; PMSCL; PMSCL2; Polymyositis/scleroderma autoaigen 100 kDa; Polymyositis/scleroderma autoaigen 2 100 kDa; Polymyositis/scleroderma autoaigen 2; RRP6; Rrp6p.

核糖體RNA合成蛋白40抗體別 名 bA3J10.7; CGI 102; Exosome complex compone RRP40; Exosome complex exonuclease RRP40; Exosome compone 3; hRrp 40; hRrp40; hRrp40p; p10; PCH1B; Ribosomal RNA processing protein 40; Ribosomal RNA-processing protein 40, S. cerevisiae, homolog of; RP11-3J10.8; RRP 40; Rrp40; Rrp40p; EXOS3_HUMAN.

核糖體RNA合成蛋白42抗體別 名 EAP1; EXOS7_HUMAN; Exosc7; Exosome complex compone RRP42; Exosome complex exonuclease RRP42; Exosome compone 7; FLJ26543; hRrp42p; KIAA0116; p8; Ribosomal RNA processing protein 42; Ribosomal RNA-processing protein 42; RRP42; Rrp42p.
智力發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白BRWD3抗體Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0305生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Streptomyces│fragilis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

彭納茲沙門氏種屬: Salmonella│penarth提供形式: 凍干物安全等級: 2模式株: no9,12　z35　z6培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法

Streptomyces│sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no產(chǎn)生鏈霉素培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 28C真空冷凍干燥

Pleurotus│pulmonarius提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃

Actinocorallia│libanotica分離基物: 土壤/近海紅樹林土壤提供形式: 凍干物模式株: no可用于抗活性及抗腫瘤活性研究培養(yǎng)基: 12生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Aspergillus│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no活性物質(zhì)；抗炎培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 28C-80℃冰箱凍結(jié)

Verticillium│dahliae分離基物: 棉花病桿提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no研究培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃真空冷凍干燥法

炭黑曲霉種屬: Aspergilluscarbonarius(Bainier)Thom安全等級: 1模式株: no檸檬酸生產(chǎn)培養(yǎng)基: 15生長條件: 25-28℃