客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱：Cy3, 乙二胺

規(guī)格：1 mg/5 mg

貨號(hào)：BJP1118

分類：熒光定量PCR試劑盒

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法　

可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

蘆竹堿87-52-5實(shí)驗(yàn)方法M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb20 ul

密蒙花苷20316-62-5實(shí)驗(yàn)步驟M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb100 ul

綿馬酸ABA38226-84-5*THEX1 Antibody1000 ml

檸檬苦素1180-71-8實(shí)驗(yàn)步驟Tris-Glycine SDS Running Buffer (10X) 300 ul

松屬素480-39-7實(shí)驗(yàn)方法Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb100 ul

人參皂苷Rg2 52286-74-5 價(jià)格Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb100 ul

肉豆蔻木脂素171485-39-5價(jià)格THEX1 (D2B4) Rabbit mAb100 ul

石蒜堿476-28-8 價(jià)格PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAb20 ul

四氫小檗堿522-97-4價(jià)格PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAb100 ul

天麻素62499-27-8實(shí)驗(yàn)方法Phospho-Drosophila Akt (Ser505) Antibody100 ul

吳茱萸堿518-17-2*THEX1 (D66A11) Rabbit mAb300 ul

香葉木素520-34-3實(shí)驗(yàn)方法Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb100 ul

煙堿54-11-5實(shí)驗(yàn)步驟Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb300 ul

洋川芎內(nèi)酯I94596-28-8?實(shí)驗(yàn)方法Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb100 ul

異綠原酸A2450-53-5價(jià)格Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb20 ul

異綠原酸C32451-88-0實(shí)驗(yàn)步驟Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb100 ul

原花青素 4852-22-6實(shí)驗(yàn)方法Akt3 Antibody100 ul
Cy3, 乙二胺Pleurotus│nebrodensis分離基物: 朽木斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用菌培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 20℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Erysipelothrix│rhuriopathiae分離基物: 丹毒豬凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清定性培養(yǎng)基: 396生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物: 枝干斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生產(chǎn)代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Bacillus│thuringiensis Berliner斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 害蟲生物防治培養(yǎng)基: 141生長(zhǎng)條件: 28存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Aspergillus│niger凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 以淀粉為原料生產(chǎn)檸檬酸。培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Yersinia│pestis凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0132生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Thalassospira│lucentensis分離基物: 水樣/表層海水凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 1.生物降解；2.生物催化；3.生物活性物質(zhì)篩選；4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Stachybotrys│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生Glauconic acid or Glaucanic acid培養(yǎng)基: CM0018生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)

Escherichia│coli分離基物: 斑羚腸道凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)，形態(tài)研究，教學(xué)使用。培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。