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免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 4號染色體開放閱讀框40抗體 |
英文名稱 | C4orf40 |
貨號 | BJ-K7794 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
CSNK1A1L antibody70 kDa Q8N752Human, Mouse, Rat資源名稱黃傘分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CSNK1G1 antibody49 kDa Q9HCP0Human, Mouse, Rat, Monkey資源名稱白囊耙齒菌分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no
CSNK2A1 antibody45 kDa P68400Human, Mouse, Rat資源名稱水粉杯傘分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CSNK2A2 antibody37 kDaP19784Human, Mouse, Rat資源名稱輪枝孢屬分離基物:楊樹葉部提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CSPG4,NG2 antibody240-250 kDa Q6UVK1Human, Mouse, Rat資源名稱草莖點霉分離基物:蘆葦提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CSPP1 antibody141kdQ1MSJ5Human, Mouse, Rat資源名稱立枯絲核菌分離基物:苜蓿草提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
c-SRC antibody60 kDa P12931Human, Mouse 資源名稱樟子松枯梢病分離基物:樟子松提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
停滯棒桿菌號:143491-57-0英文名字:Emtricitabine分子式:C8H10FN3O3S分子量:247.25恩曲他濱的溶解性,恩曲他濱在水中的溶解性,恩曲他濱在鹽水中的溶解性,恩曲他濱在PBS緩沖液中的溶解性,恩曲他濱在DMSO、醇等有機溶劑中的溶解性,
多粘芽孢桿菌號:1537732-1英文名字:Ertapenemsodium分子式:C22H25N3O7S.Na2分子量:497.5016物理性狀及指標:
白色念珠菌號:1042277英文名字:Famciclovir分子式:C14H19N5O4分子量:321.33物理性狀及指標:
桿菌屬號:8738572英文名字:Fidaxomicin分子式:C52H74Cl2O18分子量:1058.04非達霉素的溶解性,非達霉素在水中的溶解性,非達霉素在鹽水中的溶解性,非達霉素在PBS緩沖液中的溶解性,非達霉素在DMSO、醇等有機溶劑中的溶解性,
羊肚菌屬(斜面)號:6990-06-3英文名字:Fusidine分子式:C31H48O6分子量:516.72夫西地的溶解性,夫西地在水中的溶解性,夫西地在鹽水中的溶解性,夫西地在PBS緩沖液中的溶解性,夫西地在DMSO、醇等有機溶劑中的溶解性,
4號染色體開放閱讀框40抗體雜色曲霉Human SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) Kit 人胚惡性畸胎瘤細胞
無Human CKMT1A (Creatine Kinase, Mitochondrial 1A ) Kit 人子宮平滑肌肉瘤細胞
門多薩假單胞菌Human CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) Kit 前列腺癌細胞
鴨疫里氏桿菌Human KRT10 (Keratin, Type I Cytosketal 10) Kit膀胱癌
埃里鏈格孢Human SNRPD1 (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide D1) Kit 耐DDP鼻咽癌胞,1μg/ml
沃氏富鹽菌Human SNRPC (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide C) Kit 鼻咽癌細胞
鮑姆木層孔菌Human SBEM (Small Breast Epithial Mucin) Kit轉lmpl基因鼻咽癌細胞
釀酒酵母Human CMR (Costimulatory Molecules Receptor) KitSUNE-1亞株9-4E
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