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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體 |
英文名稱 | BPTF |
貨號 | BJ-K7453 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
ASPH antibody26kdQ12797Human資源名稱土白蟻叢毛單胞菌分離基物:白蟻安全等級:1模式菌株:yes
Asprosin antibody20 kDa P35555 Human, Mouse資源名稱韓國叢毛單胞菌分離基物:濕地,韓國安全等級:1模式菌株:yes
ASPRV1 antibody28kd,37kdQ53RT3Human, Mouse, Rat資源名稱腸膜明串珠菌安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生右旋糖酐,做臨床輸液用
ASRGL1 antibody32 kDa Q7L266Human, Mouse, Rat資源名稱Dokdonlafugitiva分離基物:盆栽土壤安全等級:1模式菌株:yes
ASS1 antibody45 kDa P00966Human, Mouse, Rat資源名稱Dokdonlaginsengisoli分離基物:人參場的土壤,韓國安全等級:1模式菌株:yes
ASS1 antibody45 kDa P00966Human, Mouse, Rat資源名稱短短芽孢桿菌分離基物:植物根際土壤提供形式:凍干物安全等級:1
ASTL antibody46 kDa Q6HA08Human資源名稱腸炎沙門氏菌亞利桑那亞種提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no
胰闊圓盤吸蟲PCR檢測試劑盒 Eurytrema pancreaticumPCR規(guī)格:250g用途:加入卵黃,用于厭氧梭狀芽孢桿菌的分離培養(yǎng)
闊盤吸蟲通用PCR檢測試劑盒 Eurytrema spp.PCR規(guī)格:20支詳情介紹
皮炎外瓶霉PCR檢測試劑盒 Exophiala dermatitidisPCR規(guī)格:250g用途:用于鏈球菌等苛求菌培養(yǎng)(加入5-10%脫纖維羊血)
大片吸蟲PCR檢測試劑盒 Fasciola giganticaPCR規(guī)格:10ml*20支/包用途:用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌增菌培養(yǎng)
肝片吸蟲PCR檢測試劑盒 Fasciola hepaticaPCR規(guī)格:250g用途:用于飼料中沙門氏菌血清學(xué)鑒定培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體球孢白僵菌Human ARO (Aromatase) Kit人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;KLE
QT6 細胞Human BLVRB (Biliverdin Reductase B) Kit人卵巢腺癌細胞;OVCAR-3
香菇Human ACA-IgA (Anti-Cardiolipin Antibody IgA) Kit人結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]
磚紅鐮刀菌Human ACA-IgG (Anti-Cardiolipin Antibody IgG) Kit人肝腹水腺癌細胞;SK-HEP-1
馬賽菌Human ACA-IgM (Anti-Cardiolipin Antibody IgM) Kit人結(jié)直腸腺癌細胞;Caco-2
科羅拉多擬無枝酸菌Human ACD (Adrenocortical Dysplasia Homolog) Kit人小細胞肺癌細胞;DMS 153 [DMS153]
粟酒裂殖酵母Human ACH (Acetylcholine) Kit人前列腺癌細胞;LNCaP1
長根小奧德蘑鱗柄變種Human AChE (Acetylcholinesterase) Kit人前列腺癌細胞;LNCaP2
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