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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>菌種>>食品檢測(cè)>> 煙色擬盤多毛孢保存
規(guī)格參數(shù):
資源名稱 煙色擬盤多毛孢保存
種屬: Pestalotiopsis│adusta
分離基物: 紅樹(shù)
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 16
生長(zhǎng)條件: 25-28℃
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
Apoptosis enhancing nucleasedTTP, 100 mM Solution0.25 ml小鼠磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)免疫試劑盒
ATAD5dNTP Set, 100 mM Solutions4x0.25 ml小鼠磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體(pEGFR)免疫試劑盒
phospho-AKT (Ser473)dNTP Set, 100 mM Solutions4x1 ml小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)免疫試劑盒
ATP7BdNTP Set, 100 mM Solutions4x5 ml小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)免疫試劑盒
ACSF4dNTP Mix, 10 mM each0.2 ml小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒
ACPL2dNTP Mix, 10 mM each1 ml小鼠亮氨酸腦啡肽(Leu-ENK)免疫試劑盒
AHNAK2dNTP Mix, 10 mM each5x1 ml小鼠鏈球菌(SK)抗體(IgG)免疫試劑盒
ARL6dNTP Mix, 2 mM each1 ml小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)免疫試劑盒
Procine hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA試劑盒Arabic gum>99%,醫(yī)藥級(jí)
PROG ELISA試劑盒 Arabic gum>99%,醫(yī)藥級(jí)
protein 1/mocyte chemotactic and activating factor,MCP1/MCAF ELISA試劑盒Amlodipine>99.0%,BR
PV ELISA試劑盒Amlodipine>99.0%,BR
Rabbit 50% complement hemolysis,CH50 ELISA試劑盒Amlodipine>99.0%,BR
Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA試劑盒AmlodipineHPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha,8-epi-PGF2α ELISA試劑盒Nizatidine>98.5%,USP31
Rabbit acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA試劑盒 Nizatidine>98.5%,USP31
Rabbit acetylcholine,ACH ELISA試劑盒Nizatidine>98.5%,USP31
rabbit adiponectin,ADP ELISA試劑盒Carboxymethyl cellulose 粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s
Rabbit adramycin,ADR ELISA試劑盒Carboxymethyl cellulose 粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s
rabbit adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA試劑盒Fludarabine≥99.0%,BR
Rabbit alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA試劑盒Fludarabine≥99.0%,BR
Rabbit Amylin ELISA試劑盒 Fludarabine≥99.0%,BR
Rabbit amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA試劑盒FludarabineHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
煙色擬盤多毛孢保存人經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤細(xì)胞株,L428細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,HUV-EC細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞,DAMI細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞,U251細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人淋巴瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人淋巴母細(xì)胞,T2 (174xcem.T2 )細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
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