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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>熒光核酸試劑>> 5 mg/25 mgCy5.5
產(chǎn)品名稱:Cy5.5
規(guī)格:5 mg/25 mg
貨號(hào):BJP1128
分類:熒光核酸試劑
產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
染料法
探針?lè)ā?/span>
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
·電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
·完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針?lè)ǎ?/span>
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。
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檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針?lè)ǎ?,可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
鹽酸小檗6078-17-7*Phospho-Stathmin (Ser38) (D19H10) Rabbit mAb20 ul
異蓮心堿6817-41-0*Phospho-Stathmin (Ser38) (D19H10) Rabbit mAb100 ul
重樓皂甙I50773-41-6實(shí)驗(yàn)步驟Cripto (D81B12) Rabbit mAb (Human Specific)100 ul
構(gòu)樹(shù)堿A173220-07-0*Sox1 Antibody100 ul
白皮杉醇10083-24-6?*Sox2 (L73B4) Mouse mAb1 Pack
鬧羊花毒素II26116-89-2 *SignalSlide® Mouse PD-L1 IHC Controls100 ul
松屬素480-39-7*LIN28B Antibody100 ul
澳洲茄126-17-0價(jià)格PSMD14 (D18C7) Rabbit mAb100 ul
大豆皂苷Bb51330-27-9*IL-2Rβ Antibody100 ul
蒙花甙480-36-4價(jià)格Cleaved Caspase-1 (Asp297) (D57A2) Rabbit mAb20 ul
斷血流皂甙A916347-31-4實(shí)驗(yàn)步驟Cleaved Caspase-1 (Asp297) (D57A2) Rabbit mAb100 ul
絞股藍(lán)皂苷XLIX 實(shí)驗(yàn)方法Rig-I (D33H10) Rabbit mAb100 ul
麥角固醇57-87-*p75NTR (D8A8) Rabbit mAb1 Kit
漢黃芩素632-85-9*Insulin/IGF-1 Signaling Pathway Antibody Sampler Kit100 ul
白蠟樹(shù)素6035-49-0實(shí)驗(yàn)方法YB1 (D299) Antibody100 ul
DL-甲硫氨酸保存Eg5 (4H3-1F12) Mouse mAb1Kit
BOC-L-脯氨酸使用說(shuō)明書(shū)FastScan™ Phospho-CREB (Ser133) Kit100 ul
Cy5.5Streptomyces│griseorubens分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Aspergillus│versicolor分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生物轉(zhuǎn)化研究培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Mycobacterium│tuberculosis凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Pseudoalteromonas│sp.分離基物: 沉積物/表層沉積物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)酶微生物/潛在的產(chǎn)甲殼多糖酶菌株培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 20℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│amyloliquefaciens凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)淀粉酶培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Halomonas│sp.分離基物: 沉積物凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 大洋細(xì)菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 20-30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌種屬: Yersinia│enterocolitica凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分群(型) 41,42 生物1培養(yǎng)基: CM0116生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 4b IV 6...培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Pediococcus│sp.分離基物: 泡豬耳朵汁凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 發(fā)酵產(chǎn)乳酸,生產(chǎn)青貯飼料,制作泡菜。培養(yǎng)基: CM0006生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
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