免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
BactoTM Agar人小腦顆粒細(xì)胞微小RNA2-氟-4--5-甲基吡啶GPR30(G Protein Coupled Receptor 30)  G蛋白偶聯(lián)受體30抗原

平板計數(shù)瓊脂人海馬趾神經(jīng)元微小RNA2-氟-4--5-甲基吡啶GnRHR peptide  促性腺激素釋放激素受體抗原

Plate Cou Agar人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞微小RNA乙氧甲?；寤iSS-1R/GPR54/GPCR54(KiSS-1 receptor/G-Protein Coupled Receptor 54)  G蛋白偶聯(lián)受體54抗原

R2A瓊脂人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長微小RNA乙氧甲?；寤RK2/BARK1 (G-protein coupled receptor kinase 2)  G蛋白偶合受體激酶2抗原

R2A Agar人雪旺細(xì)胞微小RNA乙氧甲酰基三基溴化膦GRM2/GLUR2 (Glutamate Receptor Metabotropic 2)  促代謝型谷氨酸受體2抗原

m HPC瓊脂人神經(jīng)束膜細(xì)胞微小RNA六氟-2,4-戊二酮鋁GRP78(glucose regulated protein 78)  葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗原（熱休克蛋白70蛋白5）

m-HPC Agar人星形膠質(zhì)細(xì)胞微小RNA六氟-2,4-戊二酮鋁GSK-3 Alpha (Glycogen Syhase Kinase-3 alpha)  葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)

D/E中和瓊脂人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞微小RNA雙氯芬酸phospho-GSK-3 Beta(pSer9)  磷酸化葡萄糖合成激酶-3β抗原

lamin A/FITC  熒光素標(biāo)記核纖層蛋白AIgG高分子量角蛋白ToceranibPorcine ALB (Albumin) 檢測試劑盒

Laminin Beta1/FITC  熒光素標(biāo)記層粘連蛋白β1IgG22號染色體開放閱讀框39N-羥基-異丁酰胺Porcine HP (Haptoglobin) 檢測試劑盒

lamin B/FITC  熒光素標(biāo)記核纖層蛋白BIgG周期素GN-羥基-異丁酰胺Porcine CRP (C-Reactive Protein) 檢測試劑盒

lamin C/FITC  熒光素標(biāo)記核纖層蛋白CIgGCrk p38鉻藍(lán)Porcine PLG (Plasminogen) 檢測試劑盒

Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核纖層蛋白A/CIgG磷酸化Crk p38鉻藍(lán)Porcine FBG (Fibrinogen) 檢測試劑盒

LAIR-1/CD305/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體1IgG核心結(jié)合因子α1(成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子)Cbfα1鉻藍(lán)Porcine MYO (Myoglobin) 檢測試劑盒

LAIR-2/CD306/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體2IgG膽囊收縮素8五氟酸酐Porcine FABP3 (Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle and Heart) 檢測試劑盒

Langerin/CD207/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞分化抗原CD207IgG細(xì)胞表面趨化因子受體1五氟酸酐Porcine IL-6 (Ierleukin 6) 檢測試劑盒
20號染色體開放閱讀框118抗體鐮刀Mouse FETUA (Fetuin A)  Kit

黃曲霉*Mouse SDC1 (Syndecan 1)  Kit

*灰葡萄孢M(jìn)ouse IGFBP5 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5)  Kit  

漫游孢囊屬Mouse ApoA2 (Apolipoprotein A2)  Kit

枯草芽孢桿 BMouse ApoC3 (Apolipoprotein C3)  Kit

稻麥穗孢霉Mouse CYP2E1 (Cytochrome P450, family 2, subfamily E, polypeptide 1)  Kit

無花果曲霉Mouse MOG (Myin Oligodendrocyte Glycoprotein)  Kit

刺芹側(cè)耳（杏鮑菇）Mouse AZGP1 (Zinc-alpha-2-glycoprotein)  Kit