免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
Phospho-RSK2 (Ser227)  磷酸化核糖體S6激酶RSK2丹參酚酸B甲酯2-氟-6-(三氟甲基)溴芐Mouse F-E3 (Free estradiol)檢測試劑盒

Phospho-RSK2 (Tyr529)  磷酸化核糖體S6激酶RSK2桑辛素2-氟-6-(三氟甲基)溴芐Mouse PRL (Prolactin) 檢測試劑盒

RSK3/Ribosomal S6 kinase 3  核糖體蛋白S6激酶家族RSK3桑皮苷A乙二胺四二酐Mouse MYO (Myoglobin) 檢測試劑盒

Phospho-RSK3 (Thr353/356)   磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3桑皮苷C乙二胺四二酐Mouse -T (Troponin T)檢測試劑盒

Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360)   磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3基酞二亞乙基三胺五二酐(DTPA)Mouse -I (Troponin I) 檢測試劑盒

RSV  呼吸道合胞病單克隆甲基蓮心堿1,2-雙（二甲基瞵）乙烷Mouse PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A)檢測試劑盒

RXR Alpha/RXRA  核受體RXRα新穿心蓮內(nèi)酯1,2-雙（二甲基瞵）乙烷Mouse ALP (Alkaline Phosphatase) 檢測試劑盒

RXR gamma  維甲酸受體G氧化芍藥苷2,4-二羥基嘧啶-5-羧酸Mouse NSE (Neuron-Specific Enolase) 檢測試劑盒

GADD45γ相互作用蛋白1Monkey CDK4 (Cyclin Depende Kinase 4) 檢測試劑盒

GTP結(jié)合蛋白4（慢性腎功能衰竭蛋白）Monkey CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) 檢測試劑盒

磷酸化gamma氨基丁酸B型受體1Monkey PDIA5 (Protein Disulfide Isomerase A5) 檢測試劑盒

磷酸化谷氨酸受體2Monkey TPO (Thyroid Peroxidase) 檢測試劑盒

磷酸化鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12Monkey PSG1/SP1 (Pregnancy Specific Beta-1-Glycoprotein 1) 檢測試劑盒

珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1Monkey MBP/MBL (Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) 檢測試劑盒

谷胱甘肽過氧化酶3Monkey Ai-CIIAb (Ai-Type II Collagen Aibody) 檢測試劑盒  

谷胱甘肽過氧化酶4Monkey SDC1 (Syndecan 1) 檢測試劑盒
載脂蛋白H抗體Bacillus│thuringiensis提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃真空冷凍干燥法

Actinoplanes│missourieneis分離基物: 土壤表層5-10cm處提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28-30℃-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Bacillus│jeotgali分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 832生長條件: 30℃真空冷凍干燥法

Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no以糖蜜為原料發(fā)酵生產(chǎn)酒精。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃真空冷凍干燥法

Pichia anomala提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no醬油增香培養(yǎng)基: YM 培養(yǎng)基：酵母提取物，3.0 g 麥芽提取物，3.0 g 葡萄糖，10.0 g 蛋白棟，5.0 g 瓊脂，20.0 g 蒸餾水1000 ml ，pH 6.2 +/- 0.2生長條件: 28℃，好氧真空冷凍干燥法

Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25定期移植法

Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no釀造啤酒。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃真空冷凍干燥法

問號(hào)狀鉤端螺旋體種屬: Leptospira│ierrogans提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式株: no血清學(xué)分型　Pyrojenes　robinsoni培養(yǎng)基: CM0114生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法

Chaetomium│globosum提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃-80℃冰箱凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法