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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
AKIRIN1蛋白抗體 | AKIRIN1 | BJ-K6669 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導(dǎo)細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
RUNX1/AML1 急性髓細胞白血病1蛋白茯苓酸2,4-二羥基嘧啶-5-羧酸Mouse GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1)檢測試劑盒
phospho-RUNX1/AML1(Ser249) 磷酸化急性髓細胞白血病1蛋白偽金絲桃素1,6-庚二炔Mouse ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) 檢測試劑盒
phospho-RUNX1(Ser303) 磷酸化急性髓細胞白血病1蛋白大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷1,6-庚二炔Mouse ANGPTL2 (Angiopoietin Like Protein 2) 檢測試劑盒
Runx3 Runx3桑根酮C1,6-庚二炔Mouse ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) 檢測試劑盒
S6PDH 6-磷酸山梨脫氫酶洋川芎內(nèi)酯A4-叔丁基硫酚Mouse ANG-R-Tie1 (Angiopoietin Receptor Tie1) 檢測試劑盒
S100B S100B蛋白洋川芎內(nèi)酯H4-叔丁基硫酚Mouse ANG-R-Tie2 (Angiopoietin Receptor Tie2) 檢測試劑盒
S100A1 S100A1洋川芎內(nèi)酯I4-叔丁基硫酚Mouse AGT (Angiotensinogen) 檢測試劑盒
S100A13 S100A13番瀉苷元A4,7,13,16,21,24-六氧-1,10-二氮雙環(huán)[8.8.8]二十六烷Mouse ANG1 (Angiopoietin 1) 檢測試劑盒
高爾基體膜蛋白GP73Monkey OSM (Oncostatin M) 檢測試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體172BMonkey NUMA1 (Nuclear Mitotic Apparatus Protein 1) 檢測試劑盒
生發(fā)中心B淋巴細胞相關(guān)蛋白2Monkey SHBG (Sex Hormone Binding Globulin) 檢測試劑盒
G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3Monkey NPYR1 (Neuropeptide Y Receptor Y1) 檢測試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體124(腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記物)Monkey MIgD (Membrane IgD) 檢測試劑盒
半乳糖凝集素1Monkey BALP (Bone Alkaline Phosphatase) 檢測試劑盒
α葡萄糖苷酶2Monkey GAD1 (Glutamate Decarboxylase 1) 檢測試劑盒
半乳糖凝集素7Monkey NUP188 (Nucleoporin 188kDa) 檢測試劑盒
AKIRIN1蛋白抗體大腸埃希氏種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 312生長條件: 37℃真空冷凍干燥法
Sinorhizobium│meliloti分離基物: 根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no2.3% NaCl生長與苜蓿共生固氮培養(yǎng)基: 0053生長條件: 28-30℃真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
Alternaria│tenuissima分離基物: 蒼術(shù)葉片提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no科學(xué)研究培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃真空冷凍干燥法
Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物: 果實提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法
Pseudoalteromonas│marina分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no微生物/耐冷培養(yǎng)基: 471生長條件: 15℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomonospora│sp.分離基物: 鹽土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no環(huán)境培養(yǎng)基: CM0331生長條件: 37-45C真空冷凍干燥
Candida│tropicalis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no發(fā)酵亞硫酸廢液。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃真空冷凍干燥法
Penicillium│sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 24-28℃
Aspergillus usamii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no酒精糖化種; 纖維素酶培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件: 25-28℃,好氧液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
多克隆抗體定制:
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
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