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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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亞鐵氧化酶(HP)測(cè)試盒微量法

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-08-19 20:48:37瀏覽次數(shù):120次

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貨號(hào) BJ-01611365-1
亞鐵氧化酶(HP)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:磷化細(xì)絲蛋白A抗體KCNA5/FITC 熒光su標(biāo)記通道混合相關(guān)蛋白亞型5抗體IgG
磷化細(xì)絲蛋白A抗體Ku-70/FITC 熒光su標(biāo)記DNA修復(fù)Ku70抗體IgG
名稱規(guī)格小鼠結(jié)腸癌;CT26.WT [CT26WT]人熱休克70(HSP-70)ELISA試劑盒,
血紅細(xì)胞溶解500毫升小鼠畸胎瘤;F9小鼠狀旁激相關(guān)(PTHrP)ELISA試

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

亞鐵氧化酶(HP)測(cè)試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-01611365-1

商品介紹:

測(cè)定意義:

Hephaestin (HP)作為銅藍(lán)蛋白的同系物,是近年來發(fā)現(xiàn)的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白亞鐵氧化酶,HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內(nèi)鐵代謝。HP的表達(dá)可受鐵、銅及鋅等金屬離子的調(diào)節(jié)。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+,在介導(dǎo)鐵的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中有重要作用。

測(cè)定原理:

HP催化Fe2+氧化為Fe3+,F(xiàn)e2+和ferrozine反應(yīng)顯色,在560 nm下有特征吸光值。通過測(cè)定Fe2+的減少速率可測(cè)得亞鐵氧化酶的活性。

自備用品:

酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

葡萄糖氧化酶1抗體糞腸球菌蛋白mei(枯草桿菌)

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子HOXD9抗體阿孫鏈霉菌肝su鈉

羥基酰谷胱水解酶樣蛋白抗體同絲毛殼鏈脲佐菌su

熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體食品檢測(cè)用鼠傷胸腺嘧啶

Heme結(jié)合蛋白2抗體解芽孢桿菌解亞種2′-脫氧腺苷-5′-三磷suan三鈉鹽

肝粘附分子2抗體大麗輪枝孢2′-脫氧胸苷-5′-二磷suan三鈉鹽

氨基己糖苷酶D抗體枯草芽孢桿菌-β-環(huán)糊精

HHLA2蛋白抗體白痢沙門氏菌亞硝鈷鈉

羥脯ansuan抗體放射桿狀根瘤菌萘酚AS-TR乙suan酯

熱休克蛋白10抗體壺黑蛋巢布諾德變型鎢suan銀

同源盒蛋白PRH抗體香菇大葉茜草su

羥類固脫氫酶17β抗體谷ansuan棒桿菌槲皮su-3-O-β-D- 葡萄糖

皰疹病相關(guān)泛su特異性蛋白mei7抗體釀酒酵母石斛

同源異型盒基因HOXA5蛋白抗體黃曲霉五味子(北五味子)

異染色質(zhì)蛋白1-α(HP1α)抗體棲土曲霉山藥
亞鐵氧化酶(HP)測(cè)試盒微量法低氧誘導(dǎo)因子1α (HIF-1α)試劑盒Anti-CCL4L1 Antibody β-連環(huán)蛋白抗原(β-β鏈接su)

肥大類胰蛋白mei(MCT)試劑盒Anti-CCNA1 Antibody磷suan化β-連環(huán)蛋白抗原

伴刀豆球蛋白A(ConA)試劑盒  Anti-CCNA1 Antibody微管蛋白(抗原)

蛋白酪ansuan磷suan酶受體B(PTPRB)試劑盒Anti-CCNA1 Antibody核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1(多肽)

suP450家族成員7A1(CYP7A1)試劑盒 Anti-CCNA2 Antibody組織蛋白meiB抗原

β2糖蛋白1IgM(β2-GP1 Ab IgM)試劑盒Anti-CCNB1 Antibody組織蛋白meiL抗原

窖蛋白(Cav-1)試劑盒 Anti-CCNB1IP1 Antibody成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(多肽)   

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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