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貨號 | BJ-01611126-2 |
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商品介紹:
測定意義:ATP廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測定ATP含量并且計算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。測定原理:肌酸激酶催化肌酸和ATP反應(yīng)生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量,以此反應(yīng)ATP含量。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
ATP含量測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-01611126-2 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
白分化抗原CD2AP根瘤菌豬鈣聯(lián)蛋白(CNX)elisa定量檢測試劑盒
CD33抗原(大、小鼠)蘇云金芽孢桿菌豬主要穹窿蛋白(MVP)elisa定量檢測試劑盒
CD34抗原(表面的唾液粘蛋白)桂花耳*豬戊糖su(PTD)elisa定量檢測試劑盒
CD38多肽(小鼠、大鼠)秦氏蜜環(huán)菌豬纖維介su蛋白(FGL2)elisa定量檢測試劑盒
CD38抗原(人)芽孢桿菌豬跨膜絲an酸蛋白mei2(TMPRSS2)elisa定量檢測試劑盒
CD36(多肽)嗜中溫寒冷桿菌豬二肽基肽酶X (DPP10)elisa定量檢測試劑盒
CD7抗原解芽孢桿菌豬BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)elisa定量檢測試劑盒
CD40L抗原阿姆斯特丹曲霉豬谷an酸脫羧酶(GAD)elisa定量檢測試劑盒
CD44抗原 (多肽抗原)解角質(zhì)su微桿菌豬集落激因子2受體α (CSF2Rα)elisa定量檢測試劑盒
抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3大腸桿菌豬轉(zhuǎn)錄激活因子7(ATF7)elisa定量檢測試劑盒
醋酸促生長激su釋放肽2斐濟球腔菌豬活化蛋白C(APC)elisa定量檢測試劑盒
醋酸促生長激su釋放肽6淡紫擬青霉豬角化內(nèi)分泌因子(KAF)elisa定量檢測試劑盒
五勝肽/美容肽—M肽假單胞菌屬豬GTP酶活化蛋白(GAP)elisa定量檢測試劑盒
醋酸美拉諾坦II嗜麥芽寡單胞菌豬載脂蛋白B(ApoB)elisa定量檢測試劑盒
五勝肽聚生殼菌豬角蛋白17(CK17/KRT17)elisa定量檢測試劑盒
ATP含量測試盒可見分光光度法轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)試劑盒 Anti-KLK9 Antibody酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移酶2
鳥an酸氨酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)試劑盒Anti-KNG1 Antibody腫瘤壞死因子受體超家族成員27
催乳su(PRL)試劑盒Anti-KLRD1(CD94) Antibody四分子交聯(lián)體14(四旋蛋白)
脂質(zhì)運載蛋白1(LCN1)試劑盒Anti-KLRK1 Antibody甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1相關(guān)蛋白26
促胰液su/su受體(SCTR)試劑盒Anti-KNG1 Antibody線粒體外膜受體Tom20
生長因子受體結(jié)合蛋白7(Grb7)試劑盒Anti-KPNA2 Antibody腫瘤壞死因子配體超家族成員12
Corin蛋白(CRN)試劑盒Anti-KRIT1 Antibody高表達蛋白4
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