免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
XRCC2 aibody32 kDaO43543Human, Mouse, Rat

XRCC4 aibody45 kDaQ13426Human, Mouse, Rat

XRCC5/Ku80 aibodyRefer to figuresP13010Human

XRN1 aibody100 kDa, Observed 100 kDa, 55 kDa Q8IZH2Human, Mouse

XRN2 aibody108 kDa Q9H0D6Human, Mouse, Rat

XRP2 aibody40 kDaO75695Human

XYLT1 aibody53 kDa Q86Y38Human, Mouse, Rat

myocardin相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體別 名 AMKL; Bsac; Mal; Megakaryoblastic leukemia 1 protein; Megakaryocytic acute leukemia protein; MKL (megakaryoblastic leukemia)/myocardin like 1; MKL/myocardin like protein 1; MKL/myocardin-like protein 1; Mkl1; MKL1_HUMAN; MRTF A; Mrtf A; MRTF-A; MRTFA; MYOCARDIN RATED PROTEIN; Myocardin rated transcription factor A; Myocardin-rated transcription factor A.

致癌基因抗體別 名 myc target 1; Myc target 1; MYCT 1 protein; Myc target in myoid cls protein 1; Myc target protein 1; 1110020B04Rik; AI225941; AI642973; FLJ21269; MGC156309; MGC156310; Mt-Mc1; MTLC; Mtmc1; MYCT1; MYCT1_HUMAN; Myct1; MTMC1.

絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體別 名 c COT; Cancer Osaka thyroid oncogene; Cancer Osaka thyroid oncogene; CCOT; COT; COT proto oncogene serine/threonine protein kinase; EST; ESTF; Ewing sarcoma transforma; FLJ10486; M3K8_HUMAN; MAP3K 8; MAP3K8; Mitogen activated protein kinase kinase kinase 8; Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 8; Proto oncogene cCot; Proto-oncogene c-Cot; Serine/threonine protein kinase cot; Serine/threonine-protein kinase cot; TPL 2; TPL-2; TPL2; Tumor progression locus 2.
肌動蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體Streptosporangium│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no活性物質(zhì)，次核苷酸脫氫酶抑制活性培養(yǎng)基: CM0038生長條件: 28C-80℃冰箱凍結(jié)

Pichia│fermeans提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Auricularia│auricula-judae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no食用、藥用培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

提供形式: 濾紙片表達(dá)載體培養(yǎng)基: LB培養(yǎng)基:酵母粉5g/L，蛋白胨10g/L，10g/L，固體添加2%瓊脂粉，151oC滅30min。生長條件: ;

Photobacterium│mandapamensis分離基物: 水樣/海水提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no指示/發(fā)光細(xì)；發(fā)光基因研究培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Maribaculum│marinum分離基物: 水樣/上層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no1.海洋石油污染生物修復(fù); 2.生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus分離基物: 病料提供形式: 凍干物安全等級: 2模式株: no研究培養(yǎng)基: 396生長條件: 37真空冷凍干燥法;

Marivitacryptomonadis種屬: Marivitacryptomonadis分離基物: 海洋浮游生物安全等級: 1模式株: yes模式株培養(yǎng)基: 102生長條件: 30℃

Bacillus│thuringiensis分離基物: Grain提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 266生長條件: 28-30℃真空冷凍干燥法