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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 22號染色體開放閱讀框36抗體 |
英文名稱 | C22orf36 |
貨號 | BJ-K8424 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Ephrin A1 EphA1馬錢苷(番木鱉苷、馬錢素)十一烷二酸Human C3a (Compleme Compone 3a) 檢測試劑盒
EphA4 酪氨酸蛋白激酶A4正己酸R-1,1'-聯(lián)-2-萘酚Human C3bR (Compleme Fragme 3b Receptor) 檢測試劑盒
Ephrin B Ephrin B甲基丁香酚R-1,1'-聯(lián)-2-萘酚Human C3b (Compleme Fragme 3b) 檢測試劑盒
phospho-Ephrin B (Tyr331) 磷酸化Ephrin B香葉R-1,1'-聯(lián)-2-萘酚Human C3c (Compleme Fragme 3c) 檢測試劑盒
phospho-Ephrin B (Tyr317) 磷酸化Ephrin B鬼臼素S-聯(lián)萘酚Human NPYR2 (Neuropeptide Y Receptor Y2) 檢測試劑盒
phospho-Ephrin B (Tyr298) 磷酸化Ephrin BD-半乳糖酸S-聯(lián)萘酚Human C4b (Compleme Compone 4b) 檢測試劑盒
phospho-Ephrin B (Tyr324/329) 磷酸化Ephrin B千金藤素S-聯(lián)萘酚Human C5c (Compleme C5 Convertase) 檢測試劑盒
EphA2/Eph receptor A2 內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶異亮氨酸S-聯(lián)萘酚Human C5b (Compleme Fragme 5b) 檢測試劑盒
短鏈脫氫酶/還原酶家族9Porcine TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) 檢測試劑盒
短鏈脫氫還原酶13Porcine CTAGE (Cutaneous T-Cell Lymphocyte Associated Aigen) 檢測試劑盒
視網(wǎng)膜短鏈脫氫酶/還原酶家族7Porcine PGM (Phosphoglucomutase) 檢測試劑盒
短鏈脫氫酶/還原酶家族XPorcine ANG-R-Tie1 (Angiopoietin Receptor Tie1) 檢測試劑盒
短鏈脫氫酶/還原酶家族4Porcine RE (Resistin) 檢測試劑盒
干擾腎細胞癌蛋白2Porcine ANG I R-Ab (Angiotensin I Receptor Aibody) 檢測試劑盒
DGCR2蛋白Porcine PKCδ1 (Protein Kinase C Delta ) 檢測試劑盒
短鏈脫氫酶/還原酶家族7CPorcine PSG1/SP1 (Pregnancy Specific Beta-1-Glycoprotein 1) 檢測試劑盒
22號染色體開放閱讀框36抗體芽孢桿Porcine ITIH4 (Ier Alpha-Globulin Inhibitor H4) Kit
豬瘟病熒光RT-PCR檢測試劑盒Porcine GDF3 (Growth Differeiation Factor 3) Kit
芽孢桿屬Porcine GS (Gsolin) Kit
纖細白僵Porcine OBTF4 (Octamer Binding Transcription Factor 4) Kit
棘刺青霉Porcine CNAP2 (Coactin Associated Protein Like Protein 2) Kit
節(jié)桿屬Porcine INSL3 (Insulin Like Protein 3) Kit
大腸桿Porcine CCRL1 (Chemokine C-C-Motif Receptor Like Protein 1) Kit
產(chǎn)氣巴斯德Porcine α-GST (α-glutathione S-transferases) Kit
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