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雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長(zhǎng)因子)抗體

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-12-28 16:27:24瀏覽次數(shù):142次

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免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

 雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長(zhǎng)因子)抗體

英文名稱

 Amphiregulin

貨號(hào)

 BJ-K6576

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抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Polycystin 2  多囊腎蛋白22”-O-沒(méi)食子?;鸾z桃苷3,4-二甲氧基肉桂酸Human LOXL4 (Lysyl Oxidase Like Protein 4 ) 檢測(cè)試劑盒

PP-1B  蛋白磷酸酯酶-1B9-甲氧基喜樹堿3,4-二甲氧基肉桂酸Human FRSF1B (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1B) 檢測(cè)試劑盒

PP2A alpha  蛋白質(zhì)磷酸酶-2A鹽酸石蒜堿3,4-二甲氧基肉桂酸Human ACCPA (ai-cyclic citrullinated peptide aibody) 檢測(cè)試劑盒

PP2A alpha  蛋白質(zhì)磷酸酶-2A光甘草定3-氟-4-(三氟甲基)甲Human LL-37 (Aibacterial Protein LL-37) 檢測(cè)試劑盒

PP2Ac  磷酸酯酶-2Ac橙黃決明素羥基檸檬酸Human Tα1 (Thymosin-α1) 檢測(cè)試劑盒

PPAR-delta/beta   D型-過(guò)氧化酶活化增生受體荷葉堿羥基檸檬酸Human PS1 (Presenilin 1) 檢測(cè)試劑盒

PPAR alpha   α型-過(guò)氧化酶活化增生受體鷹嘴豆芽素A利托君鹽酸鹽Human PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) 檢測(cè)試劑盒

PPAR Gamma  過(guò)氧化酶活化增生受體γ10-羥基喜樹堿利托君鹽酸鹽Human PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) 檢測(cè)試劑盒

葡萄糖果糖還原酶2Monkey PROC (Protein C) 檢測(cè)試劑盒

膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α1樣蛋白Monkey BLNK (B-Cell Linker Protein) 檢測(cè)試劑盒

GHDC蛋白Monkey TPP1 (Tripeptidyl Peptidase I) 檢測(cè)試劑盒

甘油激酶5Monkey CgA (Chromogranin A/Pancreastatin) 檢測(cè)試劑盒

β半乳糖苷酶1樣蛋白3Monkey IL-18 (Ierleukin 18) 檢測(cè)試劑盒

糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1Monkey GPI (Glucose 6 Phosphate Isomerase) 檢測(cè)試劑盒

腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2Monkey GzmB (Granzyme B) 檢測(cè)試劑盒

神經(jīng)節(jié)苷脂誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白1Monkey MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 檢測(cè)試劑盒
雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長(zhǎng)因子)抗體Streptococcus│pneumoniae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式株: no制造診斷血清  IV培養(yǎng)基: CM0109(10%脫纖維羊血營(yíng)養(yǎng)瓊脂)生長(zhǎng)條件: 37℃真空冷凍干燥法

脆弱鏈霉種屬: Streptomyces│fragilis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: yesType strain. Produces azaserine培養(yǎng)基: 0038生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Aureobasidium│pullulans分離基物: 生物樣/桐花樹/葉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no近海酵母培養(yǎng)基: 513生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法

Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no主要用于根瘤固氮機(jī)理的研究培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 37℃真空冷凍干燥法;定期移植法

Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no釀造酒精。培養(yǎng)基: CM0013生長(zhǎng)條件: 28-30℃真空冷凍干燥法

Pseudomonas│fluorescens提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk分離基物: 喜樹提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 28定期移植法

Pleurotus│cystidiosus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0017生長(zhǎng)條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法

Aspergillus│terreus Thom分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25定期移植法

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