當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> BMP內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白抗體
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | BMP內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白抗體 |
英文名稱 | BMPER |
貨號 | BJ-K7296 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。?
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
ADI1 antibody20 kDa Q9BV57Human, Mouse, Rat資源名稱茯苓(斜面)提供形式:試管斜面安全等級:1模式菌株:no
ADIPOQ antibody26 kDa Q15848Human, Mouse資源名稱植物乳桿菌(胚芽乳桿菌)提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no
ADIPOQ antibody33 kDaQ15848Human, Mouse, Rat資源名稱B組鏈球菌提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no
ADIPOR2 antibody44 kDa Q86V24Human, Mouse, Rat資源名稱腸道致病性大腸埃希氏菌提供形式:凍干粉安全等級:2模式菌株:no
ADK antibody41 kDa P55263Human, Mouse, Rat資源名稱法國蜜環(huán)菌(斜面)提供形式:斜面培養(yǎng)物/凍干物安全等級:1模式菌株:no
ADM2 antibody16 kDa Q7Z4H4Human資源名稱擴(kuò)展青霉(斜面)分離基物:水果提供形式:凍干物安全等級:1
ADNP antibody135 kDa Q9H2P0Human, Mouse, Rat資源名稱淡紫擬青霉(斜面)提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no
幼蟲芽胞桿菌PCR檢測試劑盒 Bacillus larvaePCR規(guī)格:250g用途:用于檢測纖維分解微生物
地衣形芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 Bacillus licheniformisPCR規(guī)格:250g用途:用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng),也可用于金黃色葡萄球菌的MPN測定和藥品灌裝線無菌試驗(yàn)。
規(guī)格:250g用途:用于支原體分離和培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
芽孢桿菌通用PCR檢測試劑盒 Bacillus spp.PCR規(guī)格:D-環(huán)絲氨用途:0.2g
枯草芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 Bacillus subtilisPCR規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌(除傷寒沙門氏菌和志賀氏菌外)分離培養(yǎng)
BMP內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白抗體雜色曲霉SMAD luciferase reporter plasmid 熒光素酶報(bào)告基因(報(bào)告基因質(zhì)粒) 人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]
桔橙小單孢菌Rb luciferase reporter plasmid 熒光素酶報(bào)告基因(報(bào)告基因質(zhì)粒) 人羊膜細(xì)胞;WISH
枯草芽孢桿菌PU.1 luciferase reporter plasmid 熒光素酶報(bào)告基因(報(bào)告基因質(zhì)粒) 血管平滑肌細(xì)胞;T/G HA-VSMC
棕黑腐質(zhì)霉pGMLR-TK luciferase reporter 海腎慢病毒報(bào)告基因顆粒 人二倍體細(xì)胞;H
墳?zāi)构?jié)桿菌pGM-Lu陰性對照質(zhì)粒人正常肝細(xì)胞;L-02
雞白痢沙門氏菌pGMLu-CMV陽性對照質(zhì)粒人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA
布雷鏈格孢Pax6 luciferase reporter plasmid 熒光素酶報(bào)告基因(報(bào)告基因質(zhì)粒) 人胚肺二倍體細(xì)胞;HL
pBIFC-VC155p53 luciferase reporter plasmid 熒光素酶報(bào)告基因(報(bào)告基因質(zhì)粒) 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2
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