免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

?
抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
?
抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
Phospho-PPAR Gamma (ser112)  磷酸化過氧化酶活化增生受體γ可可堿五聚乙二單癸Human IL-35 (Ierleukin 35) 檢測(cè)試劑盒

PPIG  親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIGD-松DL-氨酰-DL-正纈氨酸Human TK1 (Thymidine Kinase 1, Soluble) 檢測(cè)試劑盒

Phospho-PPIG (Ser376)  磷酸化親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG常春藤皂苷元DL-氨酰-DL-正纈氨酸Human 12-LO (Arachidonate 12-Lipoxygenase) 檢測(cè)試劑盒

PKB/Akt1  蛋白激酶B花椒素雙甘肽 鹽酸鹽Human VIL1 (Villin 1) 檢測(cè)試劑盒

phospho-AKT/PKB (Ser473)  磷酸化蛋白激酶B白花前胡雙甘肽 鹽酸鹽Human  PI3/Elafin (Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived) 檢測(cè)試劑盒

phospho-Akt(Thr308)  磷酸化蛋白激酶B佛手柑內(nèi)酯3-氨基-L-酪氨酸Human TTPα (Alpha Tocopherol Transfer Protein) 檢測(cè)試劑盒

phospho-Akt (Thr450)  磷酸化蛋白激酶B左旋肉堿6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉 鹽酸鹽Human FNDC5 (Fibronectin Type III Domain Coaining Protein 5) 檢測(cè)試劑盒

Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155)  磷酸化組蛋白去乙?；?、5、7矢車菊素-3-O-葡萄糖苷6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉 鹽酸鹽Human IL-21 (Ierleukin 21) 檢測(cè)試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體18Monkey RAG-2 (Recombination Activating Gene 2) 檢測(cè)試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體119Monkey Thyronine 檢測(cè)試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體88Monkey PLAA (Phospholipase A2 Activating Protein) 檢測(cè)試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體125Monkey OTF2A (Octamer Transcription Factor 2A) 檢測(cè)試劑盒

谷氨酸受體紅藻氨酸離子2/谷氨酸受體6Monkey TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) 檢測(cè)試劑盒

谷氨酸受體紅藻氨酸離子3/谷氨酸受體7Monkey EXT1 (Exostoses 1) 檢測(cè)試劑盒

谷氨酸受體紅藻氨酸離子2/3Monkey ANKRD1 (Ankyrin Repeat Domain 1) 檢測(cè)試劑盒

離子型谷氨酸受體4Monkey ApoM (Apolipoprotein M) 檢測(cè)試劑盒
磷酸化水通道蛋白2抗體棘孢小單孢種屬: Micromonospora│echinospora提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)生Geamcin B慶大霉素B培養(yǎng)基: CM0394生長(zhǎng)條件: 35C真空冷凍干燥

Streptomyces│griseolus分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑活性培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

Lactarius│piperatus (L.) Pers.分離基物: 體提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25定期移植法

Alphaherpesvirinae│Duck plague virus分離基物: 病雞結(jié)痂提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式株: no研究培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37真空冷凍干燥法;

Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no抗細(xì)培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C-80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

Streptomyces│canus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0027生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

Saccharomyces│cerevisiae分離基物: 曲藥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no釀酒培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Bacillus│subtilis提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no檢測(cè)。培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃礦物油法

Vibrio│parahaemolyticus提供形式: 凍干物；凍結(jié)物模式株: no培養(yǎng)基: 820生長(zhǎng)條件: 22℃-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法