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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
粘附相關(guān)激酶抗體 | AXL | BJ-K6578 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導(dǎo)細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) 磷酸化組蛋白去乙?;?、5、7氯化矢車菊素6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉 鹽酸鹽Human SSADH (Succinate-semialdehyde dehydrogenase, mitochondrial) 檢測試劑盒
PKN2 蛋白激酶N25-羥色胺酸5-溴基異萘酸Human POS/OSF-2 (Periostin) 檢測試劑盒
RKIP Raf激酶抑制蛋白亥茅酚苷5-溴基異萘酸Human MMP-15 (Matrix Metalloproteinase 15) 檢測試劑盒
PKR 蛋白激酶R異鼠李素-3-O-新橙皮苷5-溴基異萘酸Human MMP-14 (Matrix Metalloproteinase 14) 檢測試劑盒
Phospho-PKR (Thr446) 磷酸化蛋白激酶R紫蓳靈(S)-(+)-1,2,3,4-四氫-1-萘胺Human VLDL (Very Low Density Lipoprotein) 檢測試劑盒
Phospho-PKR (Thr451) 磷酸化蛋白激酶R高麗槐素(S)-(+)-1,2,3,4-四氫-1-萘胺Human LCAT (Lecithin-Cholesterol Acyltransferase) 檢測試劑盒
Phospho-PKR (Thr446/451) 磷酸化蛋白激酶R秦皮苷(S)-(+)-1,2,3,4-四氫-1-萘胺Human CYP2E1 (Cytochrome P450, family 2, subfamily E, polypeptide 1) 檢測試劑盒
AKT2 蛋白激酶B2奇任2-氨基茚滿鹽酸鹽Human UCRP (Ubiquitin Cross Reactive Protein) 檢測試劑盒
磷酸化離子型谷氨酸受體4Monkey HNRPU (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein U) 檢測試劑盒
代謝型谷氨酸受體1AMonkey NGF (Nerve Growth Factor) 檢測試劑盒
細胞周期蛋白依賴性激酶調(diào)節(jié)亞基2Monkey CFD (Compleme Factor D) 檢測試劑盒
β腎上腺素能受體激酶2Monkey MAGE (Melanoma-associated Aigen) 檢測試劑盒
腺苷酸環(huán)化酶Gα蛋白/Gαs/olfMonkey MCP-2/CCL8 (Monocyte Chemotactic Protein 2) 檢測試劑盒
細胞周期蛋白G相關(guān)激酶Monkey PIICP (Procollagen II C-Terminal ProPeptide) 檢測試劑盒
糖基轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1Monkey DHEA (Dehydroepiandrosterone) 檢測試劑盒
環(huán)指蛋白27Monkey PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) 檢測試劑盒
粘附相關(guān)激酶抗體Escherichia coli 提供形式: 西林瓶,片安全等級: 1模式株: 未知用于基因克隆,可用于構(gòu)建克隆,藍白斑篩選等實驗,具有鏈霉素抗性培養(yǎng)基: LB
酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min滅。生長條件: 37℃,有氧,LB-20℃避光保存;運輸條件:常溫運輸。
Pseudomonas│aeruginosa提供形式: 凍干物安全等級: 2模式株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃真空冷凍干燥法
Marella│mediterranea分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式株: no潛在的有機污染物降解/分離自石油富集群培養(yǎng)基: 745生長條件: 26℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pestalotiopsis│zonata分離基物: 苦即花葉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no內(nèi)生培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
Mortierella│isabellina提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28℃真空冷凍干燥法;定期移植法
Bacillus│thuringiensis Berliner提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no害蟲生物防治培養(yǎng)基: 141生長條件: 28定期移植法
Mesorhizobium│huakuii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no主要用根瘤的固氮功能研究培養(yǎng)基: 63生長條件: 28℃真空冷凍干燥法;定期移植法
大腸埃希氏種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 219生長條件: 37℃真空冷凍干燥法
Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk分離基物: 核桃葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25定期移植法
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
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