公司產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱：小鼠肥大細胞瘤細胞
產(chǎn)品英文代號：P815

細胞培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS+1%P/S

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

運費基數(shù)：活細胞包郵/凍存100-400元干冰費

穩(wěn)定貨期（是or否）：     是

細胞培養(yǎng)及傳代：
<1>細胞培養(yǎng)
產(chǎn)品僅用于科研細胞請于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，大部分細胞是37℃，5% CO2，濕度環(huán)境下培養(yǎng)的。有極少部分細胞培養(yǎng)條件不行，請仔細閱讀相應(yīng)的細胞說明書，使用正確的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件；
細胞于培養(yǎng)瓶或皿中培養(yǎng)，加入適量說明書上標注的細胞相應(yīng)*培養(yǎng)基（一般液面高度2-3mm即可）。
<2>細胞傳代（以下步驟適用于10cm皿）
細胞培養(yǎng)至密度達80%以上時即可傳代，先將細胞培養(yǎng)基取出3mL用15mL離心管裝好，其他培養(yǎng)基全部吸干舍棄；
培養(yǎng)皿加入2-3mL無菌PBS，輕輕晃動皿，使PBS浸洗到皿底所有部位，PBS吸干舍棄；
加入1mL胰酶，輕輕晃動皿，使胰酶浸沒到皿底所有部位，將皿蓋好放入培養(yǎng)箱中消化；
3min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞不再貼壁，即可加入*步收集的培養(yǎng)基混勻；
若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至不貼壁為止；
將細胞懸液均勻分成幾份，分別加入不同培養(yǎng)皿中，補加新培養(yǎng)基后放回培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
<3>相關(guān)問題
部分細胞在傳代后時，會有以下現(xiàn)象：細胞內(nèi)會有黑色小點、細胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細胞或者細胞長的極慢。出現(xiàn)以上現(xiàn)象時，可以咨詢本公司技術(shù)人員此現(xiàn)象是否正常及相關(guān)處理方式，不要頻繁換液，大多數(shù)細胞1周換液2-3次即可。
細胞碎片較多、背景較臟時，貼壁細胞用PBS漂洗兩次、懸浮細胞打散后低速離心（900rpm，3min）能有效改善。
傳代比例建議1:2-1:3，長得比較快的細胞可以1：3，比較慢的按1:2傳代。傳代后，建議不要使用傳代前培養(yǎng)所使用的培養(yǎng)基，會有大量細胞碎片甚至導致細胞死亡的風險。
細胞狀態(tài)不好或者生長極慢的時候，可以通過增加血清濃度調(diào)整細胞狀態(tài)及生長速度。
請不要隨意更換培養(yǎng)基，因?qū)嶒炐枰?，可以逐步馴化。
懸浮傳代：混勻細胞，收集細胞懸液900-1000rpm離心3min，棄上清。再加5ml PBS重懸細胞，再離心后，用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗一次。

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細胞凍存步驟： 
   待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
復蘇細胞步驟：    將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
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細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
產(chǎn)品僅用于科研在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備 
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象
G補綴FHA域血管生成因子1(AGGF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　紫色鏈霉菌　5mg

成纖維細胞生長因子13(FGF13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　熱帶頭梗霉　25g

亮氨酰氨基肽酶(LAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　腐皮鐮孢菌　5g

脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　95%　大隱球酵母　1g

谷氨酰胺酶(GLS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　枯草芽孢桿菌　1g

谷氨酰胺酶2(GLS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　北京擲孢酵母　5g

肌醇加氧酶(MIOX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　*蛹蟲草　1g

核纖層蛋白A/C(LMNA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　華特拉根瘤菌　5g

氨乙酰丙酸δ合酶1(ALAS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　宇佐美曲霉　25g

α1-B-糖蛋白(α1BG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　枯草芽胞桿菌枯草亞種　5g

心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　灰色鏈霉菌灰色亞種　200mg

印度刺猬因子(IHH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　Bacillus aryabhattai　100g

衰老關(guān)鍵蛋白1(FBLN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　馬賽菌　25g

NK6同源框蛋白1(NKX6-1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　芽胞桿菌　500g

橋粒芯糖蛋白2(DSG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　阿氏葡萄球菌　100g

精氨酸加壓素受體1B(AVPR1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　釀酒酵母　500g

含卷曲螺旋域蛋白3(CCDC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　少孢根霉　5g

脂肪酸去飽和酶2(FADS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　75%　德式乳桿菌乳酸亞種　100mg
小鼠肥大細胞瘤細胞廠家人肺大動脈平滑肌Human Lung: Normal Pulmonary Artery Smooth Muscle Cell Derivatives人肺大動脈平滑肌細胞提取物是從人原代肺大動脈平滑肌細胞提取的，人原代肺大動脈平滑肌細胞從正常人肺大動脈平滑肌組織制備。正常人肺大動脈平滑肌組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

人軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒Acetyl-Histone H4 (Lys16) (E2B8W) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

人軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA試劑盒GLI1 (L42B10) Mouse mAb100 ul

人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒α/β-Synuclein (Syn205) Mouse mAb20 ul

人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒α/β-Synuclein (Syn205) Mouse mAb100 ul

人低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)ELISA試劑盒GATA-6 (D61E4) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒EGF Receptor (C74B9) Rabbit mAb100 ul

人層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 α-Synuclein (Syn204) Mouse mAb20 ul

人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA試劑盒 α-Synuclein (Syn204) Mouse mAb1 Kit
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線。