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貨號(hào) | BJ-01611253-1 |
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611253-1 |
商品介紹:
測定意義: GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,大量存在于高等動(dòng)物的肝臟和弱氧化醋桿菌中。在低聚果糖生產(chǎn)中使用GCDH,不僅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量,而且生成的葡萄糖酸與鈣離子結(jié)合生成的葡萄糖suan鈣是一種理 想的補(bǔ)鈣制劑。因而,GCDH已成為制備高含量低聚果糖的理想用酶。 測定原理: GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,在340nm下測定NADH上升速率,即可反映GCDH活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體灰黃青霉大鼠熱休克因子1elisa檢測試劑盒
線粒體復(fù)合物NDUFS7蛋白抗體胎兒別樣希瓦氏菌大鼠Toll樣受體9elisa檢測試劑盒
尼曼匹克C2前體蛋白抗體釀酒酵母大鼠巨噬炎性蛋白2elisa檢測試劑盒
煙酰腺二核苷suan酶1抗體干酪乳桿菌大鼠多巴D2受體elisa檢測試劑盒
一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型)黃褐曲霉大鼠免疫球蛋白Eelisa檢測試劑盒
轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NKX6.1抗體梭菌大鼠α葡萄糖苷酶elisa檢測試劑盒
造血蛋白1抗體褐球固氮菌大鼠白三烯E4elisa檢測試劑盒
骨巢蛋白抗體根瘤菌大鼠白介su4elisa檢測試劑盒
NUP54抗體頂孢霉大鼠鈣調(diào)suelisa檢測試劑盒
親核suβ1抗體釀酒酵母大鼠腎上腺髓質(zhì)suelisa檢測試劑盒
谷ansuan受體NMDAζ1抗體寡養(yǎng)單胞菌屬大鼠Toll樣受體4elisa檢測試劑盒
谷ansuan受體NMDAζ2抗體柯奈尼亞小單孢菌大鼠同型半胱ansuanelisa檢測試劑盒
神經(jīng)元su2抗體炭疽芽孢桿菌大鼠膠原酶IIelisa檢測試劑盒
抑癌基因NDRG3抗體溶血不動(dòng)桿菌基因型4大鼠透明質(zhì)suan結(jié)合蛋白elisa檢測試劑盒
有絲分裂氧化酶1抗體灰腐質(zhì)霉大鼠血管生成su4elisa檢測試劑盒
葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒微量法多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRP1)試劑盒Anti-SMTN AntibodyFITC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
骨成型蛋白10(BMP-10)試劑盒 Anti-SMURF1 Antibody辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)試劑盒Anti-SMURF2 Antibody生物su標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
紅藻ansuan離子型谷ansuan受體2(GRIK2)試劑盒 Anti-SNAI1 AntibodyPE-Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
酪ansuan激酶2(Tyk-2)試劑盒 Anti-SMYD3 AntibodyPE-CY5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
載脂蛋白M(ApoM)試劑盒 Anti-SMURF2 AntibodyAPC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
泛su結(jié)合酶E2A(UBE2A)試劑盒 Anti-SNAI2 Antibody(PB0443)Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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