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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖代謝系列>> 堿性木聚糖酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào) | BJ-01611249-2 |
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
堿性木聚糖酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法 | 可見(jiàn)分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-01611249-2 |
商品介紹:
測(cè)定意義 木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中,BAX一般分離自最適生長(zhǎng)pH為9 -11的微生物。 測(cè)定原理 BAX在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計(jì)算BAX活力。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋,可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
A型流感病-NS1抗體(神經(jīng)ansuan酶1)頂孢霉補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物elisa檢測(cè)試劑盒
去甲腎上腺su轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺su轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體枯草芽孢桿菌蛇因子elisa檢測(cè)試劑盒
磷suan化一氧化氮合成酶3(內(nèi)皮型)抗體高山被孢霉生長(zhǎng)因子elisa檢測(cè)試劑盒
新的飽食分子蛋白抗體構(gòu)巢曲霉C反應(yīng)蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白4抗體草生毛霉牛淋巴因子elisa檢測(cè)試劑盒
性受體NK-p80抗體小孢根霉須狀變種牛血清樣蛋白Aelisa檢測(cè)試劑盒
粘附分子CD112抗體竹喙球菌熱休克蛋白60elisa檢測(cè)試劑盒
腎小球粘附分子受體抗體擬莖點(diǎn)霉白介su18elisa檢測(cè)試劑盒
成纖維核受體Nr5a2抗體乳桿菌屬白痢抗體檢測(cè)elisa檢測(cè)試劑盒
鈉鈣交換蛋白1抗體黃色短桿菌牛丙酮檢測(cè)elisa檢測(cè)試劑盒
鈉鈣交換蛋白3抗體大腸埃希菌L苯丙ansuan解氨酶elisa檢測(cè)試劑盒
天冬ansuan受體抗體黑附球菌牛白介su2受體elisa檢測(cè)試劑盒
磷suan化核因子2相關(guān)因子2(Ser40)抗體棒桿菌屬牛葡萄糖6磷suan脫氫酶elisa檢測(cè)試劑盒
Nemo樣激酶抗體球黑孢菌白介su1elisa檢測(cè)試劑盒
磷suan化Nemo樣激酶抗體長(zhǎng)枝木霉牛乙酰乙suan檢測(cè)elisa檢測(cè)試劑盒
堿性木聚糖酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法血管生成su(ANG)試劑盒Anti-SLC34A2 AntibodyAlexa Fluor 350標(biāo)記的抗馬IgM
神經(jīng)粘附分子(NCAM/CD56)試劑盒Anti-SLC39A6 AntibodyAlexa Fluor 488標(biāo)記的抗馬IgM
半乳凝集su14(GAL14)試劑盒Anti-SLC4A1 Antibody(PB0393)Alexa Fluor 555標(biāo)記的抗馬IgM
谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT)試劑盒 Anti-SLC5A2 Antibody羅丹明標(biāo)記的抗馬IgM
膠原酶I(Collagenase I)試劑盒 Anti-SLC5A1 AntibodyCy3標(biāo)記的抗馬IgM
不對(duì)稱二甲基精ansuan(ADMA)試劑盒 Anti-SLC6A1 AntibodyCy5.5標(biāo)記的抗馬IgM
巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)試劑盒Anti-SLC6A1 AntibodyCy5標(biāo)記的抗馬IgM
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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