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貨號 | BJ-0161146-1 |
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商品介紹:
測定意義: SOD(EC 1.15.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。 測定原理: 通過huang嘌呤及huang嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子(O2-),O2-可與WST-8反應(yīng)產(chǎn)生水溶性染料甲臜,后者在450nm處有吸收;SOD可清除O2-,從而抑制了甲臜的形成;反應(yīng)液黃色越深,說明SOD活性愈低,反之活性越高。 需自備的儀器和用品: 酶標儀、離心機、移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(WST8法)微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-0161146-1 |
測定步驟:
1、 酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
SAMD3蛋白抗體墳?zāi)构?jié)桿菌PCR 污染清除劑500mL規(guī)格
肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體短雙歧桿菌一管式 DNA 膠回收試劑盒30 次規(guī)格
核轉(zhuǎn)錄因子SOX22抗體費氏中華根瘤菌柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒50 次
核轉(zhuǎn)錄因子SOX4抗體硫磺絢孔菌即用型封堵液 (NC ) 50mL規(guī)格
抑制Hh信號通路蛋白SUFU抗體井草螺菌電泳級甲叉雙酰 25g
Snail蛋白抗體紅酵母屬顯影粉1袋
分泌凋亡相關(guān)蛋白1抗體皺褶莫氏黑粉菌低熔點瓊脂糖5g
肌動蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體費氏中華根瘤菌隨機引物法 DNA 探針標記試劑盒5次
線粒體載體腺核苷酸轉(zhuǎn)運蛋白6抗體扭曲毛殼海藻糖溶液,1.5M,PCR 級1.5mL規(guī)格
Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體大腸埃希菌電泳級 SYBR Green I50μL
第10號染色體開放閱讀框27抗體鏈格孢電泳級甘油100mL
5-羥色受體2A抗體糞腸球菌天凈沙非同位su探針雜交試劑盒5次
5-脂氧合酶抗體擬青霉ECL 法生物su雜交檢測試劑盒5次
SH2B蛋白抗體葛藤根瘤菌內(nèi)su清除親和介質(zhì)5mL
核突觸蛋白相互作用蛋白1抗體赭曲霉酸洗玻璃珠系列10g
超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(WST8法)微量法Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)試劑盒Anti-Epac1/RAPGEF3 Antibody反義導(dǎo)向分子RGMA
輔肌動蛋白α2 (ACTN2)試劑盒Anti-EPAS1 Antibody反義導(dǎo)向分子RGMB
周期su依賴性激酶9(CDK-9)試劑盒 Anti-EPB41L1 Antibody反義導(dǎo)向分子RGMC
神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)試劑盒Anti-EPB41L1 Antibody軸突導(dǎo)向受體蛋白3
相關(guān)血漿蛋白2(PAPPA2)試劑盒Anti-EPAS1 AntibodyG蛋白相關(guān)RABX5
L苯an酸解氨酶(PAL)試劑盒 Anti-EPB41L5 Antibody環(huán)指蛋白157
中期因子(MK)試劑盒Anti-EPCAM Antibody(PB1115)核糖核酸酶抑制因子1
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