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抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體 |
英文名稱 | phospho-ATG9A(Ser735) |
貨號 | BJ-K7060 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
RNF219 aibody80-85 kDaQ5W0B1Human
RNF25 aibody51 kDaQ96BH1Human
RNF26 aibody48 kDaQ9BY78Human, Mouse, Rat
RNF34 aibodyQ969K3Human, Mouse, Rat
RNF34 aibody41 kDa Q969K3Human
RNF38 aibody43-58 kDaQ9H0F5Human
RNF4 aibodyP78317Human, Mouse, Rat
3-Phenylpropionic acid 3-基 501-52-0 分子式:C9H10O2 分子量:150.17
Palmitic acid 棕櫚 57-10-3 分子式:C16H32O2 分子量:256.42
Stearic acid 硬脂 57-11 分子式:C18H36O2 分子量:284.48
Myristic acid 肉豆蔻 5443 分子式:C14H28O2 分子量:228.37
磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體Brevibacterium│permense分離基物: 沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式株: no潛在的有機(jī)污染物降解/分離自石油富集群培養(yǎng)基: 745生長條件: 26℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Chaetomium│globosum Kunze分離基物: 健康樹皮提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25定期移植法
Verticillium│psalliotae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃-80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
曲霉種屬: Aspergillus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 192生長條件: 24-28℃真空冷凍干燥法
Maribacter│dokdonensis分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no污染物降解微生物/潛在石油烴類降解培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Nocardiopsis│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no培養(yǎng)基: 331生長條件: 37℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法
Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not.分離基物: 楊樹干基部提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25定期移植法
Aspergillus│flavus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃定期移植法
Beauveria│bassiana提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0436生長條件: 28℃
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
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