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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 細胞色素B抗體 |
英文名稱 | Cytochrome B |
貨號 | BJ-K7744 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
CLEC9A antibody27 kDa Q6UXN8Human資源名稱灰青霉分離基物:沙土提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CLIC1 antibody30 kDaO00299Human, Mouse, Rat資源名稱四孢菇提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
CLIC3 antibody27-32 kDa O95833Human, Mouse, Rat資源名稱桿菌狀鏈霉菌分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CLIC4 antibody29 kDaQ9Y696Human, Mouse, Rat資源名稱炭疽刺盤孢菌分離基物:果實提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CLINT1 antibody68 kDa, 80 kDa Q14677Human, Mouse, Rat資源名稱純白微皮傘分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CLIP1 antibody162 kDaP30622Human, Mouse, Rat資源名稱蕓薹鏈格孢分離基物:葉片病斑提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CLIP-115/CYLN2 antibody110-120 kDa Q9UDT6Human, Mouse, Rat資源名稱粗皮側(cè)耳(平菇)分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
火雞腸炎冠狀病毒性PCR檢測試劑盒 Turkey Enteritis Coronavirus (TCoV)PCR規(guī)格:1ml/支*5用途:取一支添加于200ml亞硫鐵多粘菌素B瓊脂中
火雞出血性腸炎病毒PCR檢測試劑盒 Turkey Hemorrhagic Enteritis Virus(TuHEV)PCR規(guī)格:10個/包用途:用于大腸桿菌O157菌前增菌培養(yǎng)
差異脲原體PCR檢測試劑盒 Ureaplasma diversumPCR規(guī)格:1ml*5支用途:每支添加于90mlCC瓊脂基礎(chǔ)中
脲原體通用PCR檢測試劑盒 Ureaplasma spp.PCR規(guī)格:300ml/袋*10用途:用于阪崎桿菌選擇性增菌培養(yǎng)
解脲脲原體PCR檢測試劑盒 Ureaplasma urealyticumPCR規(guī)格:20支詳情介紹
細胞色素B抗體棲藻海桿狀菌Human EM2 (Endomorphin 2) Kit豚鼠皮膚細胞;GP-S2
芥黃蜜環(huán)菌Human ETRA (Endothin Receptor A) Kit豚鼠皮膚細胞;GP-S1
多主葡萄殼菌Human ECE1 (Endothin Converting Enzyme 1) Kit 豚鼠肺細胞;GP-F1
根瘤菌Human REPIN1 (Replication Initiator 1) Kit豚鼠胚胎細胞;104C1
松生擬層孔菌Human /LIPG (Endothial Lipase) Kit貓源細胞
Stenotrophomonas rhizophilaHuman VASPIN (Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) Kit豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM4
玫瑰考克氏菌Human VF (Visfatin) Kit 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL4
菜豆根瘤菌Human ERN1 (Endoplasmic Reticulum to Nucleus Signalling 1) Kit豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3
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